荧光激活细胞分选转基因标记斑马鱼神经元.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2013年第11期荧光激活细胞分选转基因标记斑马鱼神经元陈思杰张贺飞张翠珍彭刚（复旦大学脑科学研究院，上海 200032）摘要：对常规试验方法加以改进，使之适用于斑马鱼脑部荧光标记神经细胞的分选。以 ∶ 转基因株系为例，利 lhx5 Kaede 用转基因斑马鱼脑部制备单细胞悬液进行荧光激活细胞分选（Fluorescence-activated cell sorting ，FACS ），获得lhx5 荧光标记细胞。提取总RNA 后进行基因芯片分析从而了解lhx5 标记神经元的基因表达特性。结果显示，通过本流程可成功制备斑马鱼幼鱼脑部单细胞悬液， ∶ 平均荧光阳性率为6%。提取RNA 质量及总量均能满足基因芯片要求。基因芯片结果显示及其他标记 lhx5 Kaede lhx5 分子的表达均得到了显著富集。有效地分离斑马鱼幼鱼中枢神经系统荧光标记细胞，可用于特定细胞群的基因表达谱分析。关键词：斑马鱼转基因荧光激活细胞分选 - （） Fluorescence activated Cell Sorting FACS of Fluorescently Tagged Cells from Transgenic Zebrafish Larvae for Gene Expression Analysis Chen Sijie Zhang Hefei Zhang Cuizhen Peng Gang （，， 200032 ） Institutes of Brain Science Fudan University Shanghai It was to optimize commonly used FACS protocols to apply to fluorescence-labeled neurons of zebrafish. ∶ Abstract: lhx5 Kaede transgene line as an example was used to describe a successful protocol for isolating and expression-profiling live fluorescent-protein-labeled neurons from transgenic zebrafish brains. Numerous information of lhx5 labeling cells can be obtained by RNA profiling and would contribute to further studies. Results showed that on average, 6% of the sin