Wistar大鼠CD9的cDNA克隆、原核表达及其生殖腺中的检测.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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Wistar大鼠CD9的cDNA克隆、原核表达及其生殖腺中的检测.pdf

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生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 2011年第12期 Wistar 大鼠 CD9 的 cDNA 克隆、原核表达及生殖腺中的检测鄂尔浑塔娜李莉谷辰邢万金（内蒙古大学生命科学学院，呼和浩特 010021）摘要: 为了用 Wistar 大鼠研究 CD9 对精卵融合的影响和与其它精卵融合相关蛋白的作用，克隆了 Wistar 大鼠的 CD9 - cDNA。测序结果显示，Wistar 大鼠的 CD9 cDNA 编码区与 GenBank 中发布的 SD （Sprague Dawley ）大鼠相同，但在3 非翻译区多一个T 。用 Western blotting 方法检测 Wistar 大鼠睾丸和卵巢总蛋白发现睾丸和卵巢里均表达内源性 CD9 蛋白，分子量相同。此外， - 在大肠杆菌中表达了 GST CD9 融合蛋白，并用 GST 标签纯化 CD9 蛋白，为体外研究 CD9 与其它精卵融合相关蛋白的作用提供参考。关键词: CD9 Wistar 大鼠原核表达蛋白纯化 Molecular Cloning, Prokaryotic Expression and Identification of CD9 in Gonads of the Wistar Rat Orhontana Li Li Gu Chen Xing Wanjin （School of Life Sciences, Inner Mongolia University, Hohhot 010021 ） - Abstract: CD9 is essential to mammalian sperm egg fusion. For studying on the effect of CD9 on gamete fusion and the interaction of - CD9 with other sperm egg fusion related proteins in the Wistar rat，we cloned CD9 cDNA of the Wistar rat. The cDNA sequence of the Wistar - rat CD9 is identical to the SD（Sprague Dawley）rat released in GenBank in the coding region，but with an extra T in the 3 UTR. Western blotting analysis of the protein extracts of the gonads of the Wistar rat shows that endogenous CD9 is synthesized with the same molecular weight - in both testis and ovary. In addition，w