点突变对高加索乳杆菌醇脱氢酶酶活的影响.pdfVIP

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2016-05-13 发布于安徽
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点突变对高加索乳杆菌醇脱氢酶酶活的影响.pdf

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生物技术通报 · · BIOTECHNOLOGY B ULLETIN 20 11 9 研究报告年第期点突变对高加索乳杆菌醇脱氢酶酶活的影响张伟陈祈磊朱宝泉胡又佳 ( ， 200437 ) 上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室上海 : ，，摘要从高加索乳杆菌基因组中克隆醇脱氢酶基因构建重组表达菌后发现不同转化子具有不同的活性测序结果。，表明在部分位点发生了点突变结合生物信息学知识通过对醇脱氢酶结构与作用机理分析认为在酶关键位点的突变对酶，，。的活性影响较大而非关键位点的突变对酶活的影响虽明显降低但其突变的数目可能对酶活的影响呈现一定的累加效应 (S)- ，其中活性最高的重组菌表达了一个可将苯乙酮高选择对映还原成苯乙醇的醇脱氢酶该研究结果为酶的定向进化研究提供了理论依据。 : 关键词高加索乳杆菌醇脱氢酶点突变 The Effect of Point Mutation on the Activity of Alcohol Dehydrogenase from Lactobacillus kef ir Zhang Wei Chen Qilei Zhu Baoquan Hu Youjia (Shanghai Institute of Pharmaceutical Industry ，State Key Laboratory of New Drug and Pharmaceutical Process ，Shanghai 200437) Abstract : An alcohol dehydrogenase (ADH)gene was cloned from the genome of Lactobacillus kef ir DSM 20587 ． We found that several transformants from this ADH expression recombinants showed different alcohol dehydrogenase activity． Sequencing results con- firmed several point mutations occurring in the gene． With the help of bioinformatics ，the structure of alcohol dehydrogenase and its mo- lecular mechanism were analyzed． We suggested that the mutation occurring at key motif contributed to the great loss on the enzyme ac- tivity ，while those occurring at other points revealed minor but accumulativ