长白山林蛙输卵管糖蛋白ROGP-III的分离纯化及其鉴定.pdfVIP

生物技术通报 ·研究报告· BIOTECHNOLOGY BULLETIN 年第 期 2014 2 长 白山林蛙输卵管糖蛋白 ROGP-III 的分离纯化及鉴定 李稼晖  刘回民  赵宏宇  刘景圣 （吉林农业大学食品科学与工程学院，长春 130118） 摘 要 ： 通过正交试验确定最佳的粗提工艺，并将林蛙输卵管水提液先后通过盐析，透析，阴离子交换层析、阳离子交换 层析和葡聚糖凝胶过滤层析，获得了一种分子量大小约为66 kD 的单一蛋白，高碘酸-Schiff 试剂法鉴定其为糖蛋白。经HPLC 分析， 纯度为97.2% ，将其命名为ROGP-III ，经PNGase F 糖苷肽酶处理后推测其糖含量约为17%。 关键词 ： 林蛙油 糖蛋白 分离 纯化 鉴定 Separation and Identification of Oviduct Glycoprotein - ROGP III from Rana chensinensis 1 Li Jiahui Liu Huimin Zhao Hongyu Liu Jingsheng （College of Food Science and Engineering, Jilin Agricultural University ，Changchun 130 118 ） Abstract:  To study the function of the single glycoprotein in Rana chensinensis, this research determined the best coarse extraction process by orthogonal test, then purified a 66 kD single protein by salting out, dialysis, ion-exchange column chromatography and gel filtration chromatography. The purified protein identified as glycoprotein by PAS test. By HPLC identification, its purity is 97.2%, named as ROGP-III, after enzymolysis by PNGase F, it speculated that the polysaccharide content is about 17%. Key words:  Oviducts Rana Glycoprotein Separation Purification Identification 输 卵管分 泌 的黏性 糖 蛋 白对 脊 柱 动 物 的生殖 得单一的林蛙输卵管糖蛋 白是该研究方 向的基础 。 功 能有着 不 可替代 的作 用 ［1］ 蛋 白质 的分离纯化方法较多 ，但都 以蛋 白质 的 。 国 内外关 于 哺乳 动 物输卵管糖蛋 白分离纯化及免疫组化 的研究逐渐增 溶解性 ，分子大小 ，带 电荷数 ，疏水性大小 ，对配 多 ［2-6］ 体