升降散对脓毒血症中内毒素刺激血管内皮细胞的影响.pdfVIP

cTnT(cardiac troponinT)是心肌细胞内一种收缩调节蛋白，生理状态时血中浓度极低，心肌细胞损 度则升高，提示Ⅲ型患者存在明显心肌损伤。以往研究发现脓毒症心肌细胞损伤与以下因素有关：①脓 毒症时高凝状态造成心肌局部供血和微循环障碍”1；②内毒素、细胞因子和氧自由基损伤隅1；③高动力循 环造成室壁张力及心室充盈压增高。④细胞凋亡增加睁1。严重心肌细胞损伤导致心肌收缩功能和舒张功 能减低，加重血流动力学紊乱，促进休克和MODS发生。本研究结果显示，Ⅲ型脓毒症患者cTnT明显 升高，超声表现左室扩大、左心室舒缩功能明显减低，且预后不良，提示cTnT可作为评价脓毒症患者 左心室功能及预后的指标。 脓毒症患者左心室功能改变类型不同，预后也不尽相同。本研究显示：Ⅲ型患者发生休克、MODS 及死亡的比率明显高于另外两型，患者常于发病3～5天内死亡，病死率达73．33％，存活者左心室功能 于7～10天恢复正常，与文献报道一致”叫。Ⅱ型患者预后好于另外两型，LVEDD扩大为可逆性，常于发 病3-4天达高峰，7一10天恢复正常，不需心血管药物干预。推测该型左心室扩大可能为脓毒症时心输 出量增加的一种代偿表现，也有学者认为可能与积极的液体复苏有关，其机制尚待进一步研究。I型患 者病死率为21．56％，介于Ⅱ型与Ⅲ型之间。提示临床上可以通过观察左心室功能改变的特点，初步判断 脓毒症患者预后。 参考文献(略) 升降散对脓毒血症中内毒素刺激血管内皮细胞的影响 朱 亮 郭 健周雄根项志兵严 理钱风华 奚耀钱义明。 上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院 摘要 目的：观察升降散对内毒素刺激下血管内皮细胞分泌促炎因子及细胞凋亡的影响。方法：将 经内皮细胞传代培养后的细胞分为空白细胞组，空白细胞组+LPS 0．50m∥mL组，升降散10m∥mL+LPS0．50mg，mL组，升降散30mg／mL+LPS0．50m∥mL组，分别观察升降 散对LPS刺激内皮细胞分泌ET—l、NO、内皮细胞凋亡及刺激内皮细胞周期的影响。结果：升降散作用 液中NOS及iNOS水平。并能部分抑制LPS促细胞凋亡作用。 脓毒血症是一种系统性炎症反应过程，内毒素(LPS)作为内毒素的主要成分，可直接或间接地刺 205 激体内的巨噬细胞、中性粒细胞及内皮细胞等产生一系列的炎症细胞因子和血管活性因子”1，这些内源 及临床研究亦表明升降散对脓毒血症相关炎症因子具有一定干预作用p1。本研究选择培养的人脐静脉内 皮细胞为研究对象，观察升降散对内毒素刺激下血管内皮细胞分泌促炎因子及细胞凋亡的影响。 1．材料与方法 1．1实验材料 1．1．1人脐静脉内皮细胞系(ECV一304)：上海医药工业研究院药理室冻存和传代。 1．1．2实验药物配制：升降散由僵蚕、蝉蜕、片姜黄、大黄四味药组成，分别水煎提取至生药浓度为1000m班。 灭菌。然后用PBS稀释至所需浓度。本制剂由上海中医药大学附属岳阳中西医结合医院制剂室配制。 DIAGNOSTIC 酶联免疫试剂盒：ADLITIERAM 物技术有限公司。DAB显色试剂盒：武汉博士德生物工程有限公司。Rnase酶由中科院细胞所提供。碘 化丙啶(PI)由中科院细胞所提供。 1．2实验方法： 1．2．1内皮细胞传代培养 待细胞生长接近融合时，倒掉培养基，iJIPBS，轻轻摇动培养瓶以冲洗细胞，倾出PBS，加0．25％的 胰蛋白酶，加人量以覆盖细胞层为准。在倒置显微镜下观察，待大部分细胞收缩变圆时，弃胰蛋白酶， 加含10％血清的培养液，用吸管反复吹打细胞，接种到培养瓶内，置于37℃，5％CO：的培养箱中培养， 将传代24—48d,时的生长活跃的细胞用于实验。 1．2．2升降散的细胞毒性检测 X 采用MTT法检测。选择传代24_48小时的细胞，0．25％胰酶消化制备细胞悬液，调细胞密度2．5104 不加细胞的空白孔调零，钡．IIC∞。 1．2．3分组 (1)空白细胞组 (2)空白细胞组+IjPS 0．50mg／m1．组 (3)升降散5mg／mL+LPS0．50mg／ml姐 (4