四川理工学院第四微生物的营养和培养基.ppt

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它表示在天然环境中,微生物可实际利用的自由水或游离水的含量。 b.水活度在实际应用中的意义: 各种微生物生长繁殖范围的aw值在0.998一0.6之间。在食品保藏中,当aw降低时,微生物死亡或脱水,或处于休眠状态,因此低aw环境能抑制微生物生长,延长食品保藏时间。 3)水活度 a.概念 水活度是指在相同的温度和压力下,体系中溶液的水的蒸汽压与纯水的蒸汽压之比,即: 4)氧化还原势Eh: 是度量某氧化还原系统中的还原剂释放电子或氧化剂接受电子趋势的一种指标,其单位是v(伏)或mv(毫伏)。 好氧微生物+0.1v以上; 兼性厌氧+0.1v以上行好氧呼吸, +0.1v以下行发酵; 厌氧微生物+0.1v以下生长。 (4)经济节约 以粗代精、以废代好、以简代繁等。 2、四种方法 (1)生态模拟 (2)查阅文献 (3)精心设计 (4)试验比较 二、培养基的种类 1、按对培养基成分的了解来分: (1)天然培养基: 指利用动植物或微生物或其提取物制成的培养基。 1)特点:优点是取材方便、营养丰富、种类多样、配制方便;缺点是成分不稳定也不甚清楚,因而在做精细的科学实验时,会引起数据不稳定。 2)应用:只适合配制实验室用的各种基本培养基及大生产中的种子培养基或发酵培养基之用。 (2)组合培养基: 又称合成培养基或综合培养基,是一类用多种高纯化学试剂配制成的,各组分(包括微量元素)的量都确切知道的培养基。 1)特点:优点是成分精确、重演性高;缺点是价格较贵、配制较烦。 2)应用:一般仅用于作营养、代谢、生理、生化、遗传、育种、菌种鉴定和生物测定等定量要求较高的研究工作上。 (3)半组合培养基: 指既含有天然成分又含有纯化学试剂的培养基。 2、按培养基外观的物理状态来分: (1)固体培养基 外观呈固体状态的培养基称为固体培养基。 1)种类: 固化培养基:由液体培养基加入适量凝固剂而得; 琼脂用作培养基凝固剂的优点: 非可逆性固化培养基:凝固后不能再融化的固化培养基; 天然固态培养基:由天然固态基质配制而成; 滤膜:醋酸纤维薄膜等。 2)应用:固体培养基在科学研究和生产实践上具有广阔的用途,例如,它可用于菌种的分离、鉴定,菌落计数,检验杂菌,选种、育种,菌种保藏,抗生素等生物活性物质的生物测定,获取大量真菌抱子,以及用于微生物产品的“土法生产”(一般指用固体培养法进行生产),等等。 (2)半固体培养基: 在液体培养基中加入少量凝固剂,使培养基呈现出在容器倒置时不致流下,但在剧烈振荡后则能破碎的状态,这种培养基即为半固体培养基。半固体培养基主要用于观察细菌的运动特征、菌种保藏、噬菌体效价测定及各种厌氧菌的培养。 3)液体培养基: 指呈液体状态的培养基。在实验室中用于各种生理、代谢和获得大量菌体之用,在生产中,绝大多数发酵培养基都采用液体培养基。 (4)脱水培养基:含有除水以外的一切成分的商品培养基。 3、按培养基的功能来分: (1)种子培养基: 为了在较短时间内获得数量较多的强壮而整齐的种子细胞,而设计的一种培养基,其特点是营养丰富、全面,而氮源、维生素的比例较高。 (2)发酵培养基: 用来合成预定的发酵产物的培养基。碳源含量高。 (3)基础培养基: 含有一般微生物生长所需基本营养物质的培养基。 (4)选择性培养基: 根据微生物的特殊营养要求或其对某化学、物理因素的抗性而设计的培养基。其功能是使混合菌群中的劣势菌变成优势菌,从而提高该菌的筛选效率。 加富性选择培养基 ——投其所好 利用分离对象对某一营养物质有一“嗜好”的原理,专门在培养基中加入该营养物,成为一种加富培养基,使该微生物大大增殖,在数量上超过原有占优势的微生物,以达到富集培养的目的。 2)抑制性选择培养基——取其所抗 利用分离对象对某种制菌物质的抗性,在混合培养物中加入该抑制物质,经培养后,由于原来占优势的它种微生物的生长受到抑制,而分离对象却可趁机大大增殖,使之在数量上占据优势,从而达到富集培养的目的。 (5)鉴别性培养基: 1)概念:培养基中加入能于某一菌的无色代谢产物发生显色反应的指示剂,从而用肉眼就能使该菌菌落与外形相似的它种菌落相区分的培养基就称鉴别性培养基。 2)EMB培养基的成分及作用原理: a.成分: b.原理 其中的伊红和美蓝两种苯胺染料可抑制革兰氏阳性细菌和一些难培养的革兰氏阴性细菌。在低酸度时,这两种染料结合形成沉淀,起着产酸指示剂的作用。因此试样中的多种肠道细菌会在EMB培养基上产生相互易区分的特征菌落,因而易于辨认。尤其是大肠杆菌,因其强烈分解乳搪而

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