培养基及工艺控制.ppt

4 培养基及工艺控制 4.1 培养基 4.2 种子的扩大培养 4.3 工艺控制 4.1 培养基 总体要求是： 1）营养物质的组成比较丰富，浓度恰当，即能满足菌种的大量生长繁殖，又较适宜产物的合成； 2）在一定条件下，理化性质相对稳定； 3）粘度适中，不影响通气与搅拌的效果，且具有一定的渗透压； 4）不影响产物分离； 5）培养基各成分尽量做到因地制宜，价廉。 4.1.1成分 培养基的成分归纳起来有碳源、氮源、无机盐、微量元素、水、前体、消沫剂及其他等。 4.1.1.1?碳源 种类：生产中使用的碳源主要有糖类、油脂、有机酸和醇、碳氢化合物等。 1）糖类：常用的糖类可分为单糖、双糖、糖蜜和多糖。 （1）单糖：主要是葡萄糖和果糖，是一种速效碳源，而且是一种生理酸性物质，存在碳分解阻遏效应。 某些细菌和酵母菌因不分泌淀粉酶，只能利用单糖。 生理酸性物质：菌体利用后，使培养液的pH下降成酸性，称为酸性的物质。 （2）双糖：有蔗糖、乳糖、麦芽糖等。 （3）多糖：糊精、淀粉。 糊精是淀粉水解的产物，在放线菌和霉菌生产中常用，属于迟效碳源。 淀粉在配制过程中需要糊化和液化，便于配制、输送及利用。 糊化：在热水中，淀粉颗粒膨胀成胶状物的过程。 糊化的温度：玉米淀粉75℃，马铃薯淀粉65 ℃。 液化：胶状物的淀粉在淀粉酶的作用下被分解的过程。一般温度在60-70 ℃之间。 2）油脂： 常见的有动、植物油，如豆油、玉米油、棉籽油和猪油等。 在发酵过程中加入油脂有消泡和补充碳源的双重作用。 应用时要求供给充足的氧气，以免造成pH的下降。 3）有机酸和醇： 主要有乳酸、柠檬酸及脂肪酸、甲醇和甘油等。用于单细胞蛋白、氨基酸、维生素、麦角碱和某些抗生素的生产。 有机酸盐利用造成pH的升高。属于生理碱性物质。 4）碳氢化合物 单细胞蛋白、氨基酸、维生素、酶类、某些抗生素的生产中应用。 4.1.1.2氮源 种类：有机氮源和无机氮源两大类。 1）?无机氮源 常用的有：硫酸铵、硝酸钠、氨水等。 特点：易被菌体吸收利用，有铵阻遏效应。 改变培养液的pH。 生理碱性物质：硝酸钠、氨水。 生理酸性物质：硫酸铵 在培养基中加入适量的生理酸性物质和碱性物质，可以调节发酵液的pH。 2）有机氮源 常用的有：玉米浆、黄豆饼粉、蛋白胨、 酵母膏，麸质粉、棉籽粉等。 特点： a、成分比较复杂。 b、被菌体利用的速度不同。有速效氮源和迟效氮源之分，速效氮源有利于菌体的生长，迟效氮源有利于代谢产物的合成。 c、是引发发酵水平波动的主要因素。 4.1.1.3无机盐和微量元素 种类： 大量元素以无机盐的形式加入, 微量元素有些不必要加入，因为有机氮源中就含有足量的微量元素。 特点：低浓度时往往起刺激作用，高浓度时却表现出抑制作用。 4.1.1.4水 1）水源质量 主要参数包括：pH、硬度、污染程度等。 2）影响： 酿酒工业水质直接影响着酒的品质、影响着抗生素工业发酵单位的高低。 3）种类：地表水、深井水。 4.1.1.5前体 概念：指在产物合成过程中，被菌体直接用于产物合成而自身结构无显著改变的物质。 种类： 内源性前体和外源性前体。 （1）内源性前体:指菌体自身能够合成的物质，如合成青霉素分子的缬氨酸和半胱氨酸。 （2）外源性前体:菌体不能合成或合成很少，必须在发酵过程加入的物质。 注意：控制前体的加入方式为流加；加入量是在不影响生长的情况下，控制在上线。 4.1.1.6消沫剂 工业发酵中常用一些消沫剂消除发酵过程中产生的泡沫，防止逃液和染菌 ，保证生产的正常进行。 4.1.1.7促进剂及抑制剂 具有种特异性。 例如在四环素发酵培养基中加入硫氰化苄或M-促进剂可以抑制TCA循环中的酶，而促进四环素的合成。 巴比妥药物可以促进链霉素的合成等。 表面活性剂（吐温80、植酸）、二乙胺四乙酸（EDTA）等可以促进某些微生物酶的产量。 抑制剂，某些成分能够抑制产物的合成。 如抑氯剂，可以抑制金霉素的合成，而大量合成四环素。 4.1.2 培养基的种类和选择 4.1.2.1培养基的种类 根据培养基的用途分为孢子培养基、种子培养基、发酵培养基。 1） 孢子培养基 制备孢子使用的培养基。要求基质浓度低，尤其有机氮