二元PCR法对结核性脑膜炎的诊断价值及其影响因素的探讨.pdfVIP

目 录 中文摘要………………………………………………………………………1 英文摘要………………………………………………………………………5 研究论文 二元PCR法对结核性脑膜炎的诊断价值及影响因素的探讨 前言……………………………………………………………………．．10刚吾……………………………………………………………………．．10 材料与方法……………………………．．……………………………．11 结果……………………………………………………………………16 附图…………………………………………………………………21 附表…………………………………………………………………24 讨论…………………………………………………………………27 结论…………………………………………………………………33 参考文献 …………………………………………………………33 综述PCR法应用于结核性脑膜炎诊断的研究进展…………………．．37 致谢………………………………………………………………………．．48 个人简历………………………………………………………………．…．49 中文摘要 ————————————————————————————————————————————一——_- 二元POR法对结核性脑膜炎的诊断价值及影响因素的探讨 摘 要 目的：结核性脑膜炎(tuberculous 由结核杆菌引起的中枢神经系统感染性疾病，是结核病中最严重的类型 之一，致残率和致死率较高。近年来由于滥用药物、各种原因造成机体的 免疫力下降等许多的因素，使结脑的发病率呈回升的趋势。据统计，河北 医科大学第二医院近15年结脑的患病率，结果显示呈直线上升趋势。快 速诊断、及时治疗是影响预后的关键因素。利用培养、抗酸涂片或聚合酶 目前临床上应用的抗酸涂片染色和结核菌培养阳性率很低，对临床早期诊 断价值有限，即使有敏感性或特异性较高的新方法也尚未应用于临床，不 能够满足临床诊断的需要。PCR方法成熟，许多学者对脑脊液结核杆菌 PCR做了许多研究，结果显示此方法用于诊断结核性脑膜炎具有较高的 敏感性。为了提高CSF中结核杆菌的检出率，本课题利用二元PCR法对 结脑患者的脑脊液进行结核杆菌检测，探讨其阳性率及特异性。并分析其 与治疗疗程、脑脊液细胞学改变、生化结果的关系，了解PCR在结脑早 期诊断中的应用价值。 方法：结脑组为50例(79人份脑脊液)临床诊断为结核性脑膜炎的 患者，对照组为30例(30人份脑脊液)非结核性脑膜炎患者。所有患者 均进行脑脊液常规、生化、细胞学检查、阿利新兰染色及改良抗酸染色。 同时应用PCR法检测脑脊液中结核杆菌复合群的特异性DNA片段。收集 脑脊液lmL保存于．80。冰箱内，室温融化后用酵母基因组DNA提取试 剂盒提取脑脊液中结核杆菌的DNA，用2％琼脂糖凝胶进行电泳，在123bp 或23lbp任何一处出现条带者为阳性，均未出现条带者为阴性。通过比较 结脑组与非结脑组脑脊液结核杆菌PCR阳性率的高低，及结脑组中PCR 结果与治疗疗程、脑脊液细胞学、生化结果之间的相关性，分析PCR的 阳性率及特异性，并探讨影响脑脊液结核杆菌PCR阳性率的可能因素， 为I瞄床上诊断结脑提供更好的理论基础。 结果： 中文摘要 l临床资料：结脑患者最常见的表现为发热、头痛，也可表现脑膜 刺激征阳性、脑局灶体征、意识障碍等，但均却乏特异性，不易于其它 神经系统疾病相鉴别。 2脑脊液常规、生化检查结果：结脑组，白细胞数为70(194)×10b 1．47-4-283．66x 细胞数平均为13 19．25士6．76mmol／L：腰穿 蛋白含量平均为0．76士0．799／L：氯化物平均为1 压力平均为225．564-122．38 mmH20。 3脑脊液细胞学：从整个病程动态观察来看，结脑组50例患者中有 35例(70％)呈典型的结脑细胞学改变，渗出期呈嗜中性粒细胞反应，迅 速