近江牡蛎i-型溶菌酶基因分析及其温度对基因表达的影响.pdfVIP

热带海洋学报 JOURNAL OF TROPICAL OCEANOGRAPHY 2012 年 第 31 卷 第 6 期: 69−75 海洋生物学 doi:10.3969/j.issn.1009-5470.2012.06.011 近江牡蛎 i-型溶菌酶基因分析及温度对基因表达的影响 许友卿 1, 吴卫君 1, 丁兆坤 1, 潘志忠 2 , 何为 2 , 吴铁军 2 , 陈秀荔 2 , 李咏梅 2 , 蒋伟明 2 1. 广西大学水产科学研究所，广西 南宁 530005 ；2. 广西水产研究所，广西 南宁 530021 摘要: 溶菌酶是机体先天免疫系统中一个重要的效应分子 , 参与机体多种免疫反应。本研究克隆了近江牡蛎 Crassostrea hongkongensis i-型溶菌酶的保守 cDNA 序列, 并探讨其在不同组织的表达、不同温度对其表达的影响。 结果表明, 近江牡蛎 i-型溶菌酶保守 cDNA 序列长 634 bp, 包含一个长 420 bp 开放阅读框, 编码 139 个氨基酸； 其蛋白序列具有典型的 i- 型溶菌酶特征 , 包含特定氨基酸残基序列 CL(E/L/R/H)C(I/M)C 、部分高度保守序列 SCG(P/Y)FQI 和酶活性中心位点(Glu34 、Asp45 、Ser48 、Trp61) ；另外, 还发现一个新的氨基酸保守序列 HNGGPRGC 。 i-型溶菌酶基因在近江牡蛎消化腺、肌肉、鳃、外套膜、唇瓣等 5 种组织的表达量以消化腺最高, 鳃次之, 肌肉最 低。i-型溶菌酶基因的表达与温度相关, 水温 20—25 ℃, 其表达量比较稳定；水温 6 ℃或 13℃, 表达量都呈下降趋 势；在 27 ℃, 表达量在整个实验过程都维持一个相对高的水平；在 34 ℃, 其表达量在第 12 小时达到最高, 第 48 小 时后急剧下降；表明温度可影响 i-型溶菌酶基因表达, 从而调节其免疫功能和对外环境的应激反应。 关键词: i-型溶菌酶；克隆；表达；温度；近江牡蛎 中图分类号: P735 文献标识码: A 文章编号: 1009-5470(2012)06-0069-07 Analysis of i-type lysozyme gene from Crassostrea hongkongensis and the effect of temperature on the gene expression 1 1 1 2 2 2 2 XU You-qing , WU Wei-jun , DING Zhao-kun , PAN Zhi-zhong , HE Wei , WU Tie-jun , CHEN Xiu-li , LI 2 2 Yong-mei , JIANG Wei-ming 1．Institute for Fishery Sciences , Guangxi University, Nanning 530004, China ; 2. Guangxi Institute of Fishery Sciences, Nanning 530021, China Abstract: Lysozyme is one of the important effectors involved in a variety of immune responses in innate immune system of organisms. A conservative i-typ