第二章微生物的营养教案.pptVIP

pH调节 治标 过酸时：加NaOH、Na2CO3等碱液中和 过碱时：加H2SO4、HCl等酸液中和 过酸时 提高通气量 加适当碳源：糖、乳酸、醋酸、 柠檬酸或油脂 降低通气量 加适当氮源：尿素、 NaNO3、 NH4OH 或蛋白质等 过碱时 治本 利用缓冲物质进行pH调节： a.磷酸盐类调节： K2HPO4 KH2PO4 = 1 溶液的pH稳定在6.8 他们能在一定范围内（pH6.0-7.6）起调节作用 b.以碳酸钙作为“备用碱”进行调节： CaCO3（不溶于水的沉淀物）和NaHCO3均可用来调节培养基的pH。 ②调节氧化还原电位（Eh） 氧化还原电位是用来反映溶液中所有物质表现出来的宏观氧化-还原性。氧化还原电位越高，氧化性越强，电位越低，氧化性越弱。电位为正表示溶液显示出一定的氧化性，为负则说明溶液显示出还原性。单位是V或mV。 调节氧化还原电位（Eh）的方法： 增加氧分压：震荡培养、机械搅拌——增加Eh 加入还原剂：Vc（0.1%）、硫化氢（0.025%）、半胱氨酸、巯基乙醇、疱肉等——降低Eh 创造厌氧环境：降低Eh ②调节渗透压 渗透压过低：细胞吸水膨胀 渗透压过高：质壁分离，生长受到抑制 4. 经济节约 具体措施： 以粗代精——农副产品的副产物 以野代家——含淀粉的野生植物 以废代好——工业生产的废物 以简代繁——减少培养基种类或含量 以纤代糖——利用植物纤维素 以氮代朊——利用尿素、硝酸盐、铵盐等 5. 灭菌处理 为了避免杂菌污染，获得纯的微生物培养物，配制好的培养基必须及时严格灭菌，通常采用高压蒸汽灭菌。 一般培养基：121℃，15-30min 含糖培养基：110-115℃：20-30min 有些培养基成分需要分别进行灭菌，如牛乳培养基。 有些成分对热极度敏感，不宜高温灭菌，可采用过滤除菌，如血清。 BCG牛乳培养基： （A)溶液：脱脂乳粉100g，水500mL，加入1.6%溴甲酚绿乙醇溶液1mL，80℃灭菌20min。 (B)溶液：酵母膏10g，水500mL，琼脂20g, pH6.8, 121℃湿热灭菌20min。 以无菌操作趁热将(A)、(B)溶液混合均匀后倒平板。 二、培养基的类型及应用 （一）根据所培养微生物的种类划分 根据微生物的种类可分为：细菌、放线菌、酵母菌和霉菌培养基。 细菌：牛肉膏蛋白胨培养基（简称肉汤培养基） 放线菌：高氏一号合成培养基 酵母菌：麦芽汁培养基 霉菌：察氏合成培养基 （二）根据培养基的成分分类 1.天然培养基：化学成分不完全了解或化学成分不恒定的天然有机物配制的培养基。其主要成分如牛肉膏、酵母膏、豆芽汁、玉米粉、马铃薯等。这种培养基配制方便，经济，常用于菌种的一般性培养或发酵产物的生产。 例如：麦芽汁培养基－－酵母菌 麦芽粉——加4倍水，58~65℃糖化3~4h（期间用碘液测定）——煮沸——纱布过滤——调pH至6.0——121℃，15min 缺点：确切成分不明确，实验结果不稳定，重复性差。 2.合成培养基（组合培养基）：又称组合培养基或综合培养基，是一类按微生物的营养要求精确设计后用多种高纯化学试剂配制成的培养基。 察氏培养基配方 NaNO3 3g K2HPO4 1g MgSO4 0.5g KCl 0.5g FeSO4 0.01g 蔗糖 30g 蒸馏水 1000mL 优点：成分已知、精确、重复性好 缺点：价格较贵，配制较烦、微生物生长较慢 此种培养基适于对微生物进行代谢、分类、遗传分析等研究工作。 3.半合成培养基（组合培养基）：是指在天然培养基的基础上适当加入已知成分的化学试剂，如无机盐类，或者在合成培养基的基础上添加某些天然成分。 例如：马铃薯蔗糖培养基－－真菌 （三）根据培养基的物理状态 1.固体培养基：在液体培养基中加入凝固剂(如1.5～2.0%琼脂)。固体培养基为微生物的生长提供了一个营养表面,在这个表面生长的微生物可形成单个菌落,用于微生物的分离、鉴定、计数、保藏等。 问题：是否固体培养基中必须加入凝固剂呢？ 2.液体培养基：配制后不加任何凝固剂的水溶液或液体状态的培养基。用途广泛，可用于大规模生产和科研等。 3.半固体培养基：在液体培养基上加入一定量的凝固剂（0.2％～0.5%琼脂）,可以用来观察细胞的运动特征,鉴定菌种,测定噬菌体的效价等。 （四）根据培养基的用途划分 1.基础培养基：满足一般微生物生长繁殖所需要的营养物质。牛肉膏蛋白胨培养基是最常用的基础培养基。 有时可以根据微生物培养的需要，在基础培养基中加入所需的营养物质。 2.加富培养基：在基础培养基中加入某些特殊营养物质