胶体金法与ELISA法检测抗CCP抗体用于诊断RA的比较研究.docVIP

胶体金法与ELISA法检测抗CCP抗体用于诊断RA的比较研究 　　[摘要] 目的 比较两种检测抗CCP抗体方法的优劣。 方法 用胶体金法与ELISA法对患者血清进行抗CCP抗体检测，两种方法结果不符的以临床明确诊断确认。结果 胶体金法灵敏度85%，特异性为97.5%，假阳性率2.5%，假阴性率为15%；同ELISA法比较得出阳性符合率为98.8%，阴性符合率为98.4%。结论 两种检测方法的灵敏度和特异性无差异，均较高， 中国论文网 /6/view-7159673.htm 　　[关键词] 胶体金；ELISA；抗CCP抗体；类风湿性关节炎 　　[中图分类号] R7 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）10（a）-0025-03 　　类风湿关节炎（ rheumatoid arthritis， RA） 是常见的自身免疫性疾病，以关节滑膜慢性炎症为主要表现。目前抗环瓜氨酸肽（anti- cyclic citrullinated peptide， 抗CCP）抗体的检测方法为酶联免疫吸附法（enzyme-linked immunoabsorbent assay ， ELISA） [1]，因其检测试剂对环境及保存条件的限制，在基层医院的检验科和门诊中较难实现该项目的实验检测。胶体金免疫层析法（gold-immunochromatography assay，GICA）因对试剂保存条件与实验室环境要求不高，而且，试剂包装简易，可以单独对一份标本进行试验，其操作简便、快速，结果直观，稳定性好等，应用于抗CCP抗体检测，可快速筛选类风湿性关节炎，使类风湿性关节炎的早期诊断变成现实；满足基层医院、即时检测、床边检测的需求，将拥有巨大的市场潜力和效益[2]。该文以2013年6月―2014年7月收集的200例RA患者为研究对象，对两种诊断产品的临床检测性能进行评估研究，报告如下。 　　1 资料与方法 　　1.1 一般资料 　　收集2013年6月―2014年7月来自鸡西市矿业集团总医院确诊为200例RA患者，所有患者均符合美国风湿病协会1987年修订的RA诊断标准[3]；同时选择来该院进行健康体检的健康人员100例和非RA患者100例作为对照组；两组人员基本情况比较差异无统计学意义（P0.05）。血清标本抽取三组人员晨起空腹静脉血3～5 ml，离心后血清标本储存预 -70℃冰箱中待测。 　　1.2 试剂来源 　　抗CCP抗体检测胶体金法试剂盒由上海科新生物技术股份有限公司提供；抗CCP抗体（ELISA法）试剂盒为欧洲诊断试剂公司生产；仪器：安图96孔酶标仪，25℃恒温箱，科华洗板机。 　　1.3 检测方法 　　分别采用胶体金免疫层析法和间接ELISA法来检测患者血标本中是否含有抗CCP抗体。操作按照各自试剂盒说明书进行，质控品、标准品均作复孔且与标本同时检测。质控品检测结果符合质控要求。抗CCP抗体检测试剂盒（胶体金法）采用高度特异性的抗原抗体反应及免疫层析分析技术，测试时，血清标本滴入加样处，血清标本中的IgG与预包被在聚酯膜上的胶体金标记的二抗结合，结合物随之在毛细效应下横向层析。当血清中含有特异性抗CCP抗体时，泳动到T线时被预先包被在硝酸纤维素膜上的抗原捕获，出现阳性条带，血清中若不含待测抗体时，在T线处继续横向层析至C线，C线为预先包被非特异性抗原，结合物在C线处被捕获，此反应为非抗原特异性的反应，作为对照条带，因此无论血清是否含有特异性的抗CCP抗体均在C线处形成阳性条带。抗CCP抗体胶体金法检测结果参考范围为阴性，ELISA法： 0.75。P值的计算公式是P=2[1-Φ（z0）]两者总符合率可以达到98.0%，见表2。 　　表2 两种方法检测结果比较 　　3 讨论 　　类风湿性关节炎属于自身免疫性疾病，病因尚未明了，以慢性、对称性、多滑膜关节炎和关节外病变为主要临床表现，是一种慢性全身性炎症性疾病。类风湿属于致残性疾病，关节损害是类风湿患者最主要的病变，患病2年即可出现不可逆的骨关节破坏，如果不能诊治可出现严重的关节畸形，有些病人也会出现血管损害。类风湿性关节炎（RA）在我国发病率约为0.3%，女性患者居多。RA的早期诊断，一直是各国医学专家关注的问题[4]。现行的美国风湿病学会（ACR）诊断标准主要依靠临床表现、X线以及类风湿因子（RF）检测。当患者达到诊断标准时，患者已出现骨关节破坏，而且，类风湿因子缺乏特异性，不利于早期诊断、早期干预治疗[5]。类风湿的早期诊断可依靠环瓜氨酸的检测。Nicola等[6]研究发现环瓜氨酸抗体与人的性别、年龄没有相关性，但与早期类风湿密切相关。Schellekens[7]等研究了数百例有早期关节症状患者，随访一年后在486人中发现149人（31%）为早期