上海交大生化(刘建华).解析.ppt

肽键断裂活化酶原或蛋白质前体 消化酶在胃和胰脏是酶原的形式合成的。 血液的凝固是蛋白酶原活化的级联反应，能够对创伤应答迅速、放大。 有些蛋白激素合成的初级产物是没有活性的前体。水解删除一段肽链，才能将胰岛素前体转化成胰岛素 构成皮肤、骨的纤维蛋白胶原，来自胶原蛋白前体。胶原蛋白前体是可溶的。 很多发育过程由酶原活化控制。例如，蝌蚪形变成青蛙，几天之内就将尾巴德胶原蛋白吸收（如同哺乳动物生产后降解子宫胶原蛋白）。胶原蛋白酶前体活化成胶原蛋白酶的时间非常精确，实现组织重构。 程序化死亡或细胞凋亡是caspase蛋白酶介导的。从线虫到人类，caspases一旦活化就能启动细胞死亡。细胞凋亡给生物体提供了重构发育过程中生物体形态、清除受到感染或损伤的细胞的一种途径。 凝血酶前体能够与Ca2+结合。但是结合Ca2+有什么作用？损伤后，Ca2+结合能够将凝血酶前体锚定在血小板磷脂双层膜表面。这一步很关键，使凝血酶原到达两个血凝蛋白附近，后者将凝血酶原转化成凝血酶。删除Ca2+结合域，从膜上释放凝血酶，使之能够酶切纤维蛋白原和其他目标蛋白。 血友病揭示凝血过程的早期反应 在阐明凝血途径方面很多重要的突破源于对出血疾病的研究。经典的血友病，或血友病A，是大家熟知的凝血缺陷疾病，是性连锁隐性遗传疾病。经典的血友病，没有内在途径的VIII因子（抗血友病因子）或者这个因子的含量非常低。尽管VIII因子自身不是蛋白酶，但是它能显著促进X因子的活化。X因子活化的催化酶是IXa（一种丝氨酸蛋白酶）（图10.33）。因此血友病的内在凝血途径严重受损。 过去输入含有VIII因子的浓缩血浆治疗血友病。这种治疗技术有感染的风险。实际上很多血友病患者有肝炎或最近流行的AIDS病。需要发展更为安全的VIII因子治疗试剂。采用生物化学纯化和DNA重组技术，用培养细胞表达VIII因子。现在治疗血友病多用重组VIII因子，很少用血浆纯化的VIII因子。 图10.33 抗血友病因子（即VIII因子）的作用。抗血友病因子（即VIII因子）促进IXa因子催化的X因子的活化。凝血酶限制性酶切VIII因子能显著增加VIII因子活性。一旦达到一定的阈值，这个正反馈能放大凝血信号，加速凝血过程。 凝血必须迅速，局限于受伤区域。凝血区域局限于损伤位点的机制是什么？ 凝血因子的不稳定性有助于凝血控制。由于血液流动稀释迅速、肝脏清除、蛋白酶降解等原因，活化的凝血因子寿命短。例如蛋白酶C能够降解Va和VIIIa。蛋白酶C是凝血酶活化的蛋白酶。因此凝血酶有双重活性，即催化纤维蛋白形成，启动凝血级联反应途径销毁。 凝血因子的特殊抑制剂也是终止凝血过程所必需的。例如，组织因子途径抑制剂（TFPI）抑制TF-VIIa-Xa复合物，TFPI独立的结构域能够抑制VIIa和Xa。另一个关键的抑制剂是抗凝血因子III。这个血浆蛋白能够与凝血酶不可逆结合形成复合物，导致凝血酶活性丧失。抗凝血酶III与a1-抗胰蛋白酶相似，但是抗凝血酶III对凝血酶的抑制活性远远高于它对弹性蛋白酶的抑制活性。抗凝血酶III也能抑制凝血级联反应的其他丝氨酸蛋白酶活性，即XIIa, Xia, IXa，和Xa。肝素能够促进抗凝血酶III的抑制活性。肝素是带负电荷的多聚糖，处于血管壁附近的肥大细胞内以及血管内皮细胞的表面（图10.34）。作为抗凝剂，肝素促进丝氨酸蛋白酶凝血因子与抗凝血酶III不可逆结合的速率，达到抗血液凝固的目的。抗胰蛋白酶和抗凝血酶都是丝氨酸蛋白酶的抑制剂，属于丝氨酸蛋白酶抑制剂家族。 图10.34 肥大细胞的电子显微图。细胞受到启动分泌，细胞将向细胞外的空间释放致密颗粒内的肝素和其他分子。 凝血酶和抗凝血酶的比例很重要。有一个14岁的男孩死于出血疾病。他的a1-抗胰蛋白酶有一个氨基酸变异，即358位的甲硫氨酸突变成精氨酸。这个蛋白质正常情况下抑制弹性蛋白酶活性。但是突变后这个抑制剂抑制凝血酶活性。损伤后，a1-抗胰蛋白酶活性显著增加，阻止受到刺激的嗜中性粒细胞释放出来的弹性蛋白酶活性。而a1-抗胰蛋白酶突变体在这种情况下抑制凝血酶活性，导致出血。这是单个氨基酸变异显著影响蛋白质特异性的又一实例，也是合适含量的蛋白酶抑制剂非常重要的实例。 图10.35 组织型血纤维蛋白溶酶原活化剂(TPA)的模块结构。 抗凝血酶限制血液凝固的程度，但是对凝血块自身有什么影响？凝血快不是一个永久性结构。在恢复损伤部位的结构完整性之后，就会溶解凝血快。血纤维蛋白溶酶(plasmin)是一种丝氨酸蛋白酶，能够水解纤维蛋白螺旋的螺旋区域的肽键。血纤维蛋白溶酶经过纤维蛋白中间的含水通道扩散到凝血快内部，酶切连接棒区域的肽键。血纤维蛋白溶酶原经过蛋白酶解活化，形成血纤维蛋白溶酶。