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第二章 骨髓细胞学检验 邵阳医专医学检验系 临床检验教研室 李 小 民 主任 一、血细胞的发育过程 如图 二、 骨髓象检验的临床应用 1、适应症 骨髓细胞学检验是诊断血液系统疾病的最重要手段。 (1)外周血细胞数量及形态异常:出现原始细胞,幼稚细胞等。 (2)不明原因的发热,肝肿大,脾肿大,淋巴结肿大。 (3)不明原因的骨痛,骨质破坏。 (4)恶性血液病化疗后的疗效观察。 2、禁忌症 凝血因子缺陷疾病,晚期妊娠。 二、标本的采集和准备 (一)取材 骨髓标本应用穿刺法采集,骨髓活检标本采用环切法取材。骨髓穿刺部位以髂骨前、后上棘最常用,可同时吸取骨髓液和采取骨髓活检标本;有时也可对脊突、胸骨及胫骨作穿刺吸取骨髓液,但2-3岁以下的婴幼儿可选取穿刺胫骨头部外侧。 (三)方法 1、髂骨后上棘穿刺术 2、髂骨前上棘穿刺术 3、胸骨穿刺术 判断骨髓取材质量的标准: 1.抽取骨髓液时,病人有特殊的酸痛感; 2.有骨髓小粒和脂肪滴; 3.显微镜下可见到骨髓特有细胞,如巨核细胞、成骨细胞、破骨细胞、浆细胞、组织嗜碱细胞、纤维细胞和大量红系、粒系幼稚细胞等 (四)良好涂片 1、在骨髓取材到位前提下; 2、玻片清洁; 3、推片技术良好; 4、血膜涂片中细胞分布均匀; 5、良好的染色技术。 四、骨髓细胞学检查的内容、方法和临床意义 (一)低 倍 镜 检 查 1、确定骨髓标本的取材和涂片制作是否满意 骨髓小粒及少量脂肪小滴,骨髓特有的细胞 2、判断骨髓增生程度 骨髓增生程度通常以骨髓中有核细胞与成熟红细胞的比例来反映。骨髓增生程度通常采用五级分级法。 3、观察巨核细胞 先在低倍镜下计数全部片膜上的巨核细胞数。必要时需要检查两张以上涂片。低倍镜下见到巨核细胞后,即转换油镜观察,进行分类计数,并注意巨核细胞及血小板的形态有无异常。 (二)油 浸 镜 检 1、有核细胞分类计数 200-500个细胞 2、观察细胞形态 在进行分类计数时,仔细观察各系统细胞的形态有无异常,包括注意成熟红细胞的形态有无异常,有无特殊异常细胞出现,必要时还需注意有无寄生虫。 (三)填写骨髓细胞学检查的报告单 (1)填写病人姓名,性别,年龄,科室,病区,床号,住院号,骨髓穿刺部位,骨髓穿刺时间,临床诊断等。 (2)填写取材、涂片、染色的三级标准:良好、尚可、欠佳 (3)填写骨髓报告单中各期细胞百分比,骨髓增生程度,粒红比值等 (4)文字描述 1)骨髓片特征:①粒细胞 ②红细胞 ③淋巴细胞 ④单核细胞 ⑤全片巨核细胞 2)血片特征 3)细胞化学染色特征 (5)根据骨髓象,血象和细胞化学染色,最终填写诊断意见及建议。 ①肯定性诊断:骨髓呈特异性变化,临床表现又典型者,如各种白血病、巨幼贫、骨髓转移癌(瘤)、恶性组织细胞病。 ②支持性诊断:血象,骨髓象有形态改变,可解释临床表现,缺铁贫,溶血性贫血等。 ③可疑性诊断:骨髓象有部分变化或出现少量异常细胞,临床表现又不典型。 ④排除性诊断:骨髓中血小板易见,排除原发性血小板减少性紫癜。 ⑤形态学描述:对于提不出任何意见时,就具体描述。 (四)大致正常骨髓象 1、有核细胞增生活跃:粒红比例(G/E):2-4:1。 2、粒细胞系统:约占有核细胞的50%-60%。各发育阶段细胞的比例随着细胞的成熟而逐渐增高。一般原粒细胞1%,早幼粒细胞5%,中幼粒,晚幼粒细胞约15%,而杆状核细胞高于分叶核粒细胞,在粒细胞系中所占比例最高。嗜酸性粒细胞5%,嗜碱性粒细胞1%,这两类细胞在骨髓中所见大多为成熟型。 3、红细胞系统:幼红细胞约占有核细胞的20%,其中原红细胞1%,早幼红细胞5%,以中、晚幼红细胞为主,平均各约为10%左右。 4、淋巴细胞系统:占有核细胞的20%,幼儿偏高可达40%。以成熟淋巴细胞为主,原淋巴和幼淋巴细胞罕见。 5、单核细胞系统:一般4%,系成熟型单核细胞。 6、浆细胞系统:一般2%,以成熟阶段的浆细胞为主。 7、巨核细胞系统:巨核细胞的参考值因计数方法和标准不同,波动范围较大。以1.5cm×3cm单位面积的涂片中有7-35个为正常值;主要为颗粒型巨核细胞和产血小板型巨核细胞。血小板成群分布。 8、其他细胞:可见到极少量网状细胞、内皮细胞、组织嗜碱细胞等非造血细胞成分。 五、血细胞的细胞化学染色 (一)过氧化物酶染色 1、正常结果 ①早期原粒阴性;②晚期原粒直至中性粒细胞越成熟阳性越强;③E强阳性,B阴性;④原单阴性,幼单及成熟单为弱阳性。 (二)中性粒细胞碱性磷酸酶染色 1、参考值:成人NAP阳性率10%-40%,积分值40-80分,由于各实验室条件不同,参考值也有差异。 2、临床意义:诊断
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