如何蛋白质的空间结构？分析报告.ppt

如何解析蛋白质的空间结构？ 研究蛋白质的结构、性质和功能，首先需要得到纯的蛋白质样品。 变性蛋白质的性质改变： ① 物理性质：旋光性改变，溶解度下降，沉降率升高，粘度升高，光吸收度增加等； ② 化学性质：官能团反应性增加，易被蛋白酶水解。 ③ 生物学性质：原有生物学活性丧失，抗原性改变。 电泳的类型 目前电泳的类型很多， 最常见的是区带电泳，由于在支持物上电泳时蛋白质混合物被分离成若干区带而得名。 区带电泳按其支持物的物理性状不同可以分成几类： ① 滤纸电泳和薄膜电泳(如醋酸纤维薄膜电泳和聚酰胺薄膜电泳)； ② 粉末电泳，支持介质是淀粉、纤维素粉或硅胶粉等，粉末与适当的溶剂调和，铺设成平板； ③ 凝胶电泳，最常用的支持介质有聚丙烯酰胺和琼脂糖凝胶，前者适于分离蛋白质和多核苷酸，后者适于分离核酸，这两种凝胶电泳的分辨率都很高， 双向电泳 (two-dimensional electrophoresis) 亲和层析 蛋白质纯化方法总结： 根据蛋白质在溶液中的性质分离纯化蛋白质的方法： ①分子大小； ②溶解度； ③电荷； ④吸附性质； ⑤对配体分子的生物学亲和力等。 一、蛋白质含量测定 总蛋白质含量测定有两类方法： 1、利用蛋白质的物理性质，如折射率、比重、紫外吸收等测定。 2、利用化学方法测定蛋白质含量，如微量凯氏定氮、双缩脲反应、Folin-酚试剂法(又