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河科大附中高考生物实验专题 实验一． 观察DNA和RNA在细胞中的分布 实验原理：DNA遇甲基绿呈绿色，RNA可被吡罗红染成红色 实验步骤 步骤 器材与试剂 作用与原理 （1）制片 ①将牙签刮下的口腔上皮细胞置于载玻片上0.9%的NaCl溶液滴 ②载玻片烘干 1 0.9%的NaCl溶液防止细胞破裂，2 维持细胞形态。 3 烘干使细胞固定在载玻片上 （2）水解 8%HCl中30℃保温5分钟 盐酸能改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞，同时使染色体中的DNA与蛋白质分离。 （3）冲洗 用蒸馏水缓流冲洗10分钟 （4）染色 2滴吡罗红甲基绿染色5分钟 甲基绿使DNA染上绿色 吡罗红使RNA染上红色 （5）观察 显微镜下观察 实验结果: 细胞核呈绿色,细胞质呈红色. 分布：真核生物的DNA主要分布在细胞核中，线粒体和叶绿体内也含有少量的DNA；RNA主要分布在细胞质中。 实验二 检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质 一．实验目的：尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质 二．实验原理：某些化学试剂能使生物组织中的有关有机化合物，产生特定的颜色反应。 1．可溶性还原糖（如葡萄糖、果糖、麦芽糖）Cu 2O沉淀。 2．脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄 色（或被苏丹Ⅳ染液染成 红色）。淀粉遇碘变蓝色。 3．蛋白质与 双缩脲 试剂发生作用，产生紫色反应。 三．实验材料 1．做可溶性还原性糖鉴定实验，应选含糖高，颜色为白色的植物组织，如苹果、梨。（因为组织的颜色较浅，易于观察 反应产生 的颜色。） 2．做脂肪的鉴定实验。应选富含脂肪的种子，以花生种子为最好，实验前一般要浸泡3~4小时（也可用蓖麻种子）。 3．做蛋白质的鉴定实验，可用富含蛋白质的黄豆或鸡蛋清。 四、实验试剂 斐林试剂（包括甲液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和乙液：质量浓度为0.05g/ mL CuSO4溶液）、苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液、双缩脲试剂（包括A液：质量浓度为0.1g/ mL NaOH溶液和B液：质量浓度为0.01g/ mL CuSO4溶液）、体积分数为50%的酒精溶液，碘液、蒸馏水。 (制作临时装片的步骤：滴清水→放材料→盖片。注意盖盖玻片时如何防止气泡产生：将盖玻片的 一侧 先接触装片中央的水滴，再将盖玻片慢慢放下) 五、方法步骤： （一）可溶性糖的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 1. 制备组织样液。 （去皮、切块、研磨、过滤） 苹果或梨组织液必须临时制备。 因苹果多酚氧化酶含量高，组织液很易被氧化成褐色，将产生的颜色掩盖。 2. 取1支试管，向试管内注入2mL组织样液。 3. 向试管内注入1mL新制的斐林试剂，振荡。 应将组成斐林试剂的甲液、乙液分别 配制、储存， 使用前才将甲、乙液等量混匀成斐林试剂； 切勿将甲液、乙液分别加入苹果组织样液中进行检测。 斐林试剂很不稳定，甲、乙液混合保存时，生成的Cu ( OH ) 2在70~900C下分解成黑色CuO和水； 甲、乙液分别加入时可能会与组织样液发生反应，无Cu ( OH ) 2生成。 4. 试管放在盛有50-650C温水的大烧杯中，加热约2分钟，溶液颜色：浅蓝色 → 棕色 → 砖红色（沉淀） 用酒精灯水浴加热。 缩短实验时间。 （二）脂肪的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 花生种子浸泡、去皮、切下一些子叶薄片，将薄片放在载玻片的水滴中，用吸水纸吸去装片中的水。 干种子要浸泡3~4小时，新花生的浸泡时间则可缩短。 因为浸泡时间短，不易切片，浸泡时间过长，组织较软，切下的薄片不易成形。切片要尽可能薄些，便于观察。 在子叶薄片上滴2~3滴苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染液，染色1分钟。 染色时间不宜过长。 用吸水纸吸去薄片周围染液，用50%酒精洗去浮色，再用吸水纸吸去酒精。 酒精用于洗去浮色，若不洗去，会影响对橘黄色脂肪滴的观察。同时，酒精是脂溶性溶剂，可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴。 用吸水纸吸去薄片周围酒精，滴上1~2滴 清水 ，盖上盖玻片。 滴上清水可防止盖盖玻片时产生气泡。 低倍镜下找到花生子叶薄片最薄处，可看到细胞中有染成橘黄色或红色圆形小颗粒。 装片不宜久放。 时间一长，油滴会溶解在乙醇中。 三、蛋白质的鉴定 操 作 方 法 注 意 问 题 解 释 制备组织样液。 （浸泡、去皮研磨、过滤。） 黄豆浸泡1至2天，容易研磨成浆，也可购新鲜豆浆以节约实验时间。 鉴定。加样液约2ml于试管中，加入双缩脲试剂A，摇匀；再加入双缩脲试剂B液3~4滴，摇匀，溶液变紫色。 A液和B液也要分开配制，储存。鉴定时先加入1mlA液，再加入3-4滴B液。 CuSO4溶液不能多加。 先加Na