2015-2016学年高二人教版生物选修三配套课件：1.1 DNA重组技术的基本工具 .pptVIP

基因工程 DNA重组技术的基本工具 “分子手术刀” ——基因的载体 基因工程产品 * 1.1DNA重组技术的基本工具 专题1 基因工程 结果 基本过程 操作水平 操作对象 操作环境 基因工程的别名 基因工程是指按照人们的愿望，进行严格的设计，通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 基因拼接技术或DNA重组技术 生物体外 基因 DNA分子水平 剪切→拼接→导入→表达 人类需要的基因产物 “分子手术刀” 限制性核酸内切酶 DNA连接酶 基因进入受体细胞的载体 “分子缝合针” “分子运输车” 3.切点： 1.分布： 2.作用： 限制性核酸内切酶(简称限制酶) 4.特点： 注意.与DNA水解酶作用的异同点： 5.作用结果： CT TCATGAATTCCGTACCCGGGCCTAA GAAGTACTTAAGGCATGGGCCCGGATT EcoRⅠ限制酶酶切位点 GGCATGGG AATTCCGTACCC 黏性末端 CTTCATG GAAGTACTTAA 平末端 SmaⅠ限制酶酶切位点 GGGCCTAA CCCGGATT 原核生物容易受到自然界外源DNA的入侵，限制酶是一种防御工具，当外源DNA侵入时，会利用限制酶将外源DNA切割掉，使之失效，保证自身的安全。 因为含有某种限制酶的细胞，其DNA分子中或不具备这种限制酶的识别序列，或通过甲基化酶将甲基转移到所识别序列的碱基上，使限制酶不能将其切开。 限制酶在原核生物中的作用是什么吗？ 为什么细菌中限制酶不剪切细菌本身的DNA？ 作用：将两个DNA片段连接起来（如下图） “分子缝合针” DNA连接酶 CTTAA G AATTC G 磷酸二酯键 DNA连接酶与DNA聚合酶一样吗？为什么？ DNA聚合酶：将游离的脱氧核苷酸与DNA片段连接起来。 “分子缝合针” DNA连接酶的类型 连接末端类型 来源 连接酶 DNA连接酶 种类 T4 噬菌体 大肠杆菌 只能连接黏性末端 既可连接黏性末端，又可连接平末端。 “分子运输车” 载体的作用： 将外源基因转移到受体细胞中去。 质粒是细菌拟核DNA之外的能够自主复制的很小的环状DNA分子。 ——质粒 基因工程最常用的载体 质粒，λ噬菌体的衍生物，动植物病毒等。 载体必须具备的条件： 3、具有某些标记基因，便于进行筛选。 例如抗菌素的抗性基因、产物具有颜色反应的基因等 2、具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接； 1、能够在宿主细胞中复制并稳定地保存； 4、对受体细胞无害。 常用的载体有： 质粒 病毒 (噬菌体和动植物病毒) 基因的载体 “分子运输车” 思考： 1.某种限制酶对一个质粒有两处识别序列并切割， 最多会产生 个粘性末端， 个新的DNA片段。 2.将用同一种限制酶切割的目的基因A与质粒B混合并 加入EcoliDNA连接酶，会得到 种重组DNA分子。 （只考虑两个片段连接） 3. 延熟保鲜转基因西红柿 研究者发现，控制植物衰老激素乙烯合成的酶基因，是导致植物衰老的重要基因，如果能够利用基因工程的方法抑制这个基因的表达，番茄就不会容易变软和腐烂了。 抗虫的基因来自苏云金杆菌。苏云金杆菌形成的伴胞晶体是一种毒性很强的蛋白晶体，能使棉铃虫等鳞翅口害虫瘫痪致死。科学家将编码这个蛋白质的基因导入作物，使作物自身具有抵御虫害的能力。 抗虫棉 转基因鲑鱼 转基因超级鼠