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第三节 DNA的结构 DNA为双链分子 大多是链状结构,少部分呈环状 分子量一般都很大 真核细胞中集中在细胞核(98%以上) 种间细胞核中DNA含量有差异 线粒体、叶绿体含各自DNA 一、 DNA的一级结构 ——DNA分子上核苷酸的排列顺序 浏览书上关于基因(组)的概念 (一)DNA的二级结构 1953年,J. Watson和F. Crick 在前人研究工作的基础上,根据DNA结晶的X-衍射图谱和分子模型,提出了著名的DNA双螺旋结构模型,并对模型的生物学意义作出了科学的解释和预测。 DNA的二级结构(双螺旋) 1.DNA碱基互补原则 2. Chargaff定则/碱基等比定律: 嘌呤总数等于嘧啶总数 A+G=C+T; 6位上含氨基的碱基= 6位上含羰基的碱基; A+C=G+T 腺嘌呤和胸腺嘧啶的摩尔数相同 A=T, 胞嘧啶和鸟嘌呤的摩尔数相同 C=G DNA分子的碱基组成具有种属特异性,而不具有组织器官特异性 大 部 分 DNA 所 具 有 的 双 螺 旋 结 构 , 亦 称 为 B 型 在 真 / 原 核 细 胞 皆 有 证 据 显 示 短 的 Z 型 DNA 存 在 。 双螺旋结构的稳定因素 提问:起稳定作用的有哪些力呢? (二)RNA的二级结构特点 RNA是单链分子,因此,在RNA分子中,并不遵守碱基种类的数量比例关系,即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数。 RNA分子中,部分区域也能形成双螺旋结构,不能形成双螺旋的部分,则形成突环。这种结构可以形象地称为“发夹型”结构。 在RNA的双螺旋结构中,碱基的配对情况不象DNA中严格。G 除了可以和C 配对外,也可以和U 配对。G-U 配对形成的氢键较弱。不同类型的RNA, 其二级结构有明显的差异。 tRNA中除了常见的碱基外,还存在一些稀有碱基,这类碱基大部分位于突环部分.(含有稀有碱基最多的RNA就是tRNA) RNA中的碱基配对原则 A-U G-C tRNA的二级结构 四臂四环结构: 氨基酸接受区、 反密码区、 二氢尿嘧啶区、 T?C区和可变区。 除氨基酸接受区每个区均含有一个突环和一个臂。 (1)氨基酸接受区 包含有tRNA的3’-末端和5’-末端, 3’-末端的最后3个核苷酸残基都是CCA,A为核苷。氨基酸可与其成酯,该区在蛋白质合成中起携带氨基酸的作用。 (2)反密码区 与氨基酸接受区相对的一般含有7个核苷酸残基的区域,其中正中的3个核苷酸残基称为反密码 (3)二氢尿嘧啶区 该区含有二氢尿嘧啶。 (4) T?C区 该区与二氢尿嘧啶区相对, 假尿嘧啶核苷—胸腺嘧啶核糖核苷环(T?C)由7个核苷酸组成,通过由5对碱基组成的双螺旋区(T?C臂)与tRNA的其余部分相连。除个别例外,几乎所有tRNA在此环中都含有T?C 。 (5)可变区 位于反密码区与T?C区之间,不同的tRNA该区变化较大。 三、 DNA的三级结构 (一)真核细胞染色体的DNA念珠状三级结构 DNA的存在形式 (二)原核生物以及真核生物细胞器环状DNA的超螺旋三级结构 第四节 核酸及核苷酸的性质 一、核酸的溶解性 RNA和DNA 均微溶于水, 不溶于一般的有机溶剂 二、核酸的两性性质及等电点 核酸分子中含有酸性基团(磷酸基)和碱性基团(氨基),也具有两性性质。 DNA等电点为4~4.5; RNA等电点为2~2.5 三、核酸的紫外吸收性质 碱基含有共轭双键 独特的紫外吸收光谱:最大吸收峰260nm左右 ——核酸及其组份定性和定量测定的依据。 四、核酸的变性、复性 1、变性(denaturation) (1)变性的实质 某些理化因素破坏了氢键和碱基堆积力, 使核酸分子高级结构改变、理化性质及 生物活性发生改变。 不涉及磷酸二酯键断裂,一级结构不变 完全变性后核酸紫外吸收值增加: 天然DNA 25-40%、RNA 约1.1% ——这种由于变性或降解引起紫外吸收 增加的现象称为增色效应. 实质:碱基暴露 DNA变性 (4)DNA热变性的特征 变性过程是“跃变式”的,而非渐变,是一种协同的过程。 核酸的复性(renaturation) 变性DNA在适当的条件下,两条彼此分开的单链重新缔合成双链——复性。 复性的程度、速率与复性条件有关: 热变性DNA骤然冷却(淬火)不能复性 将变性DNA缓慢冷却(退火)可以复性 DNA复性 分子量越大复性越难; 浓度越大,复性越容易; DNA复性也与它本身组成和结构有关 (有很多重复序列DNA,复性也快)。 减色效应(低色效应) —— 用Cot1/2表示复性的速度 Co:代表DNA的原始浓度 t

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