第九章核酸的化学教材.ppt

第九章 核酸的化学 教学目的与要求： 1.掌握核酸的基本组成单位及其连接方式。 2.掌握DNA与RNA的结构与理化性质。 3.熟悉DNA及RNA的功能，基因组。 4.了解DNA变性及其应用。 教学内容： 1. 核酸的分类及其在细胞内的分布 2. 核酸的化学组成 3. DNA的分子结构 4. RNA的分子结构 5. 核酸的理化性质 本章重点：核酸的化学组成 DNA与RNA的分子结构 本章难点：DNA结构、RNA结构 英国细菌学家F．Griffith（1877－1941）于1928 年发现当他对老鼠同时注射活的R（粗糙）型无毒肺炎球菌以及加热杀死的S（光滑）型 有毒肺炎球菌时，很多老鼠不久即死亡，它们的血液中含有活的S型细菌。这一发现表 明活的无毒R型细菌从死去的有毒S型菌得到了一些什么东西从而使无毒的R型转化成有 毒的S型肺炎球菌。后来认为某些遗传信息被“转化因子”转移了。 艾弗里(Osward Avery)等人(1944)从S型细菌中分别抽提出DNA、蛋白质和荚膜物质，并把每一种成分同活的R型细菌混合，悬浮在合成培养液中。结果发现只有DNA组分能够把R型细菌转变成S型细菌。而且DNA的纯度越高，这种转化的效率也越高。这说明，一种基因型细胞的DNA进入另一种基因型的细胞后，可引起稳定的遗传变异。 第一节 核酸的分类和分布 核酸分为两大类： 脱氧核糖核酸 Deoxyribonucleic Acid （DNA） 核糖核酸 Ribonucleic Acid（RNA） RNA主要存在于细胞质中 第二节 核酸的化学组成 核酸完全水解产生嘌呤和嘧啶等碱性物质、戊糖（核糖或脱氧核糖）和磷酸的混合物。核酸部分水解则产生核苷酸。一分子核苷酸部分水解后除产生核苷外，还有一分子磷酸。每个核苷分子含一分子碱基和一分子戊糖，核酸的各种水解产物可用层析或电泳等方法分离鉴定。 （一）戊糖 （二）碱基 2. 嘧啶（Pyrimidine） （五）核苷酸衍生物 1. 继续磷酸化 2.环化磷酸化 3. 肌苷酸及鸟苷酸(强力味精) 三、核酸中核苷酸的连接方式 核苷酸的连接方式是通过一个核苷酸的C3′-OH 与另一分子核苷酸的5′-磷酸基形成3′,5′-磷酸二酯键相连而成的链状聚合物。 第三节 DNA的结构 （二）B-DNA双螺旋模型要点 双螺旋DNA的结构参数 三、DNA的三级结构 DNA双螺旋的进一步扭曲构成三级结构，即超螺旋（正、负超螺旋）结构。 线粒体DNA，病毒DNA和细菌质粒DNA都是环形DNA，天然的环形可以进一步扭曲称麻花状超螺旋结构。 原核 双链环状DNA（dcDNA） 病毒 单链环状DNA（scDNA） 单链线性DNA（ssDNA） 真核 双链线性DNA（dsDNA） DNA的存在形式 四、DNA与基因组 基因（gene）：一段有功能的DNA片段，生物细胞中DNA分子的最小功能单位（交换单位）。 基因组（genome）：某生物体（完整单倍体）所含全部遗传物质的总和。 包括：核基因组（拟核/核DNA）及核外（质粒/质体DNA） 卫星DNA按其重复单元的核苷酸的多少，可以分为两类。一类是小卫星DNA(minisatellite DNA)，由几百个核苷酸对的单元重复组成。另一类是微卫星DNA(microsatellite DNA)，由2个到20个左右的核苷酸对的单元重复成百上千次所组成 Alu序列是灵长类基因组内的特有的含量丰富的中度重复序列,由300bp的短序列所组成,在单倍体基因组中有30万～50万份拷贝,其间隔平均为5kb.到目前为止,对于Alu序列的功能了解的还不多,据推测可能与基因转录的调节,hnRNA的加工以及DNA复制的启动有关.目前已发现众多的疾病与Alu序列在基因组内的插入和不等同源重组有关。 第四节 RNA的分子结构 一、RNA的类型 mRNA（hnRNA 核不均一RNA） tRNA rRNA snRNA tRNA的三级结构 第五节 核酸的理化性质 二、核酸的紫外吸收特性 在核酸分子中，由于嘌呤碱和嘧啶碱具有共轭双键体系，因而具有独特的紫外线吸收光谱，一般在260nm左右有最大吸收峰，可以作为核酸及其组份定性和定量测定的依据。 以A260/A280进行定性、定量 （1.45 OD280–0.74OD260=蛋白浓度(mg/ml)） DNA和RNA溶液中加入溴化乙锭（EB），在紫外下发出荧光 三、核酸的变性、复性与分子杂交 1. 变性 稳定核酸双螺旋次级键断裂，空间结构破坏，变成单链结构的过程。核酸的的一级结构(碱基顺序)保持不变