现代分子生物学PBL材料.ppt

现代分子生物学PBL―基因敲除 导语 随着越来越多全基因组被测序，功能基因组学成为时下研究的热点。研究基因功能的主要有两种思路，一是增强其表达，取得表达产物进行研究，二是减弱或终止其表达，观察整体功能的变化，进而推测相应的基因功能。前者因不能反映基因产物的真实表达情况，而逐渐被抛弃。后者将基因与生物的整体功能联系起来考察，并能为基因的功能提供直接的证据，因而其技术得到不断的完善和发展，其中最常见的就是基因敲除技术。 基因敲除Gene knockout 基因敲除 基因敲除（gene knockout）是指一种遗传工程技术，针对某个序列已知但功能未知的序列，改变生物的遗传基因，令特定的基因功能丧失作用，从而使部分功能被屏障，并可进一步对生物体造成影响，进而推测出该基因的生物学功能。 基因敲除技术 同源重组 RNAi 随机插入突变 利用同源重组进行基因敲除 首先基因敲除是在同源重组和胚胎干细胞的获取及体外培养等技术及理论基础上逐步发展和完善的。 其次同源重组法基因敲除主要利用 DNA转化技术, 将含有目的基因和靶基因同源片段的重组载体导入靶细胞, 通过载体与靶细