中药分析1介绍.pptVIP

鞣 质 类 成 分 一、鞣质（Tannins）的概述 （一）定义 鞣质是植物界中一类结构比较复杂的多元酚类化合物 鞣质是由没食子酸（或其聚合物）的葡萄糖（及其他多元醇）酯、黄烷醇及其衍生物的聚合物以及两者混合共同组成的植物多元酚。 （二）分布 自然界中约70％以上的中草药含有鞣质类成分，鞣质存在于植物的皮、茎、叶、根、果实等部位。 特别在种子植物中分布很普遍。如蔷薇科、大戟科、蓼科和茜草科植物中最为多见。 一、鞣质（Tannins）的概述 （三）生物活性 A.收敛止血止泻、治烧烫伤 如四季青鞣质 B.抗菌抗病毒作用 如贯众鞣质可以抗病毒 C.D E.F G.H C解毒作用 D.降压作用 E.驱虫作用 F.抗肿瘤作用 如月见草中的月见草素B G.清除自由基、抗衰老作用 如茶多酚 H.抗过敏、抗变态反应、抗炎作用等 ＣＤ ＥＦ ＧＨ ＡＢ 一、鞣质（Tannins）的概述 性状 溶解性 与蛋白质作用 与三氯化铁作用 与重金属盐作用 与生物碱作用 与铁氰化钾氨溶液作用 还原性 理化性质 （四）理化性质 二、定性鉴别 （一）化学法 原理：利用鞣质能与蛋白质、生物碱、重金属盐反应生成沉淀或与三氯化铁作用产生蓝黑色或绿黑色反应或产生沉淀等对鞣质进行定性实验。 最常用：明胶沉淀反应和三氯化铁显色反应 应用：注射剂有关物质检查法中使用明胶沉淀法，检查不得出现浑浊或沉淀 （二）色谱法 （1）薄层色谱法 （2）高效液相色谱法 根据斑点颜色可判断鞣质类化合物的类型 用于判断鞣质分子的大小、各组分纯度及异构体 三、含量测定 鞣质为多酚类成分，与黄酮、蒽醌、简单酚等在植物体内往往共存且性质相近，容易发生缩合或降解 ------精确定量比较困难 （1）Folin—酚法 （一）化学反应法 原理：碱性溶液中酚类化合物可以将钨钼酸还原，生成蓝色化合物，颜色深浅与酚的含量正相关，在760nm处有最大吸收。 对象：试样中的总酚含量，鞣质、低分子多酚、简单酚、带酚羟基的氨基酸及蛋白质和抗坏血酸的易被氧化的物质均被测出。 （2）普鲁士蓝法 三、含量测定 原理：在酸性介质中，分类物质能将Fe3+还原成Fe2+，后者与k3Fe(CN)6生成深蓝色配位化合物，在695nm处有最大吸收。 对象：总酚含量 测定对象： 总酚含量 条件：靛蓝，烯酸 指示剂：靛蓝由蓝变黄 计算：测得的总氧化物换算成多酚量 （3）高锰酸钾法 三、含量测定 （4）酒石酸亚铁法 测定对象：含有邻位酚羟基的酚类含量 条件：在缓冲溶液（pH6.4~8.3）中加入酒石酸亚铁 现象：产生蓝色螯合物 测定：545nm处有最大吸收 计算：一定浓度范围内，溶液的吸光度与多酚浓度呈线性关系 （5）锌离子络合滴定法 测定对象：鞣质含量，选择性较好 （6）香草醛-盐酸法 测定对象：间苯三酚A环的黄烷醇和聚原花色素的含量，但无法区分单体和聚合体 三、含量测定 （二）蛋白质结合法 最简单最经典的方法：皮粉法 原理：鞣质是多元酚类，分子中有许多的酚羟基可以与蛋白质的酰胺形成氢键结合成不溶于水的沉淀，利用这个性质可以使鞣质沉淀下来，用重量法测定鞣质的含量。 缺点：?样品需要量大，且要求鞣质的含量较高，不适合低含量和微量测定?耗费时间长，不适合大批量样品的快速测定?皮粉对低分子量多酚也有一定的吸附能力，使结果偏高?对鞣质平均分子量较低的样品不灵敏 （1）蛋白质吸附法 三、含量测定 （2）蛋白质沉淀法 原理：鞣质与可溶性蛋白质结合形成不溶性的分子复合物，从溶液中沉淀出来。在一定范围内，沉淀的蛋白质的量与样品中鞣质的含量呈线性关系。 常用：化学分析法测定BSA-多酚体系 前提：鞣质-蛋白质复合物沉淀的形成 为保证测定结果的准确性、重现性和可比性，应严格控制反应因素，建议使用：0.2mol/L醋酸缓冲体系，pH4.9~5.0，0.17mol/LNacl，3ml反应体系中含BSA2mg，25℃，静置时间反应15分钟~24小时（不同种类的鞣质所需时间不同） （7）正丁醇-盐酸法 三、含量测定 测定对象：聚原花色素的含量 测定对象：专属性测定六羟基联苯二酸酯的量 原理：亚硝酸钠与HHDP在甲醇-醋酸溶液中产生蓝色化合物（红色-----蓝色） （8）亚硝酸法 三、含量测定 （3）径向扩散法 原理：鞣质溶液在含BSA的胶体中的扩散距离与鞣质浓度呈线性关系，扩散的同时形成肉眼可见的沉淀，可以测定0.5mg的鞣质，没有明显的沉淀阈值，不取决于体系中蛋白质的起始浓度。 （4）纸色谱-BSA法 测定对象：微量(5~50ug)鞣质的测定，可同时测定缩合鞣质和可水解鞣质 谢谢欣赏