抗SARS冠状病毒S1蛋白N端249至667单克隆抗体制备.docVIP

抗SARS冠状病毒S1蛋白N端249至667的单克隆抗体的制备与鉴定 作者：温坤1；梅亚波1；丘立文1；廖志勇1；袁国勇2；车小燕1　　(1第一军医大学珠江医院中心实验室，广东?? 广州 510282； 2香港大学微生物学系，香港) 摘要：目的??在获得了具有免疫原性的SARS冠状病毒S1蛋白片段的基础上，制备和鉴定特异性抗该段S1蛋白单克隆抗体(mAb)。方法??原核表达含S蛋白受体结合区的SARS冠状病毒S1蛋白片段S1c(N端249-667氨基酸残基)，其免疫原性经SARS病人恢复期血清鉴定后免疫BALB/c小鼠，按常规方法制备单克隆抗体，并采用ELISA间接法、免疫荧光和免疫印迹进行筛选和鉴定。结果??筛选出3株特异性针对SARS冠状病毒S1蛋白N端249-667的mAb杂交瘤细胞株，IgG亚类鉴定1株为IgG1，2株为IgG2a，经免疫荧光鉴定与人冠状病毒株229E和OC43无交叉反应。结论??获得3株抗SARS冠状病毒S蛋白受体结合区特异性单克隆抗体，为建立新的SARS冠状病毒检测方法的和进一步研究S蛋白的功能奠定了基础。 关键词：SARS冠状病毒；单克隆抗体；刺突蛋白；受体结合区 Preparation and characterization of monoclonal antibodies against S1 domain at N-terminal re