动物细胞融合和单克隆抗体5.ppt

植物体细胞杂交过程 动物细胞融合 动物细胞融合的目的中最重要的是A、克服远缘杂交不亲和 B、制备单克隆抗体C、培育新物种 D、生产杂种细胞能使动物细胞融合的特有的诱导因子是A、离心 B、灭活的病毒 C、电刺激 D、振动动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是（双选）A、诱导方法完全相同B、所用的技术手段不相同C、所采用的原理完全相同D、都能形成杂种细胞 单克隆抗体 动物细胞工程小结 动物细胞培养：原理、营养、条件、过程、细胞生长特点、结果、应用 动物细胞融合：原理、诱导方法、过程、应用 单克隆抗体的制备：原理、过程、特点、应用 核移植与克隆动物：供体、受体、核移植方法、克隆动物的方法、克隆动物的遗传特性、应用 动、植物细胞工程的比较：植物组培技术与动物细胞培养技术、植物体细胞杂交技术与动物细胞融合技术 * 1、总结动物细胞融合的过程？ 2、融合的结果是怎样的？ 3、诱导融合的方法有哪些？ 4、动物细胞融合有什么优点？ 5、应用于哪些方面？ 形成具有两个或多个细胞遗传信息的单核细胞 电激、聚乙二醇（PEG）、灭活病毒等 突破有性杂交方法的障碍，使远缘杂交成为可能 意义 用途 结果 诱导方法 融合前处理 原理 植物体细胞杂交 动物细胞融合 项目 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性和 植物细胞的全能性 分散成单个细胞 去除细胞壁 聚乙二醇、离心、振动、 电激、灭活病毒 聚乙二醇、离心、 振动、电激、 获得杂交细胞 获得杂种植株 制备单克隆抗体 培育作物新品种 使远缘杂交成为可能 克服远缘杂交障碍 7.在动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是 （ ） A.结果是相同的 B.杂种细胞的形成过程基本相同 C.操作过程中酶的作用相同 D.诱导融合手段的手段相同 B B B BD 1、传统抗体的获得与缺陷？ 2、杂交瘤细胞有什么特点？ 3、图中杂交瘤细胞有几种？ 4、单克隆抗体的优点？ 5、经过几次筛选？ 6、运用了什么技术手段？ 7、如何得到大量的单克隆抗体？ ⑵如何诱导融合？ 常用灭活病毒 ⑴如何得到B淋巴细胞？ 制备单克隆抗体的过程 ⑶细胞两两融合后，有哪些类型？ B-B B-瘤(杂交瘤细胞) 瘤-瘤 ⑷如何筛选出杂交瘤细胞？ 单克隆抗体制备过程中，总共有两次筛选，第一次筛选出杂交瘤细胞，第二次筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，两次筛选的原理和方法是不相同的。 ①首先用选择培养基筛选出杂交瘤细胞 ①细胞合成DNA有D和S两条途径，其中D途径能被氨基嘌呤阻断。 ②人淋巴细胞中有这两种DNA的合成途径，但一般不分裂增殖。 ③鼠骨髓瘤细胞中只有D途径，没有S途径，可是能不断分裂增殖。 你想到筛选杂交瘤细胞的方案了么？ 小资料： 在培养液中加入氨基蝶呤，收集增殖细胞！ 加入氨基嘌呤后，使 D 合成途径阻断，仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖，但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞因为可以利用淋巴细胞中的 S 途径合成DNA而增殖。 杂交瘤细胞的特点？？ 通常采用有限稀释克隆细胞的方法，将杂交瘤细胞多倍稀释，接种在多孔细胞培养板上培养，使每孔细胞不超过一个，再由这些单细胞克隆生长，然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体，那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔。最终选出分泌预定特异抗体的杂交细胞株进行扩大培养。 ②再筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞 阳性孔 方法——抗原-抗体杂交法 在单克隆抗体制备过程中，两次筛选的原理和方法是不相同的。 ⑻如何得到大量的单克隆抗体？ 体内培养 体外培养 （小鼠腹腔内） 单克隆抗体 筛选 杂交细胞 杂交瘤细胞 体外或体内 细胞培养 筛选