肠道链霉菌活性的分析.docVIP

第八届全国微生物学青年学者学术研讨会 肠道链霉菌活性分析 曹艳茹，王茜，靳荣线，姜怡‘，姜成林 云南大学云南省微生物研究所，微生物药物国家工程研究中心，昆明６５００９１ 据报道，有超过１０００万亿的微生物存在于各种动物及人的身体内。这些数 量庞大的微生物与动物的健康和疾病密切相关，发挥着多种至关重要的作用。 随着人们对这些微生物的不断了解和认识，肠道微生物受到了世界各国广泛的 高度重视。２００７年，美国国立卫生研究院（ＮＩＨ）提出了人类微生物组计划 Ｈｕｍａｎ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔ（ＨＭＰ），预计甚少要测出９００个人类肠道微生物 的基因组。而该计划的第一批研究成果，１７８个人类肠道微生物的基因组已经发 表在２０１０年第五期的Ｓｃｉｅｎｃｅ杂志上。 目前对于肠道微生物的报道绝大多数是通过分子手段，来研究这类微生物 与动物或人的健康和疾病等方面的关系，而从中获得纯培养微生物进行开发利 用的研究报道则少之又少。我们主要以白眉长臂猿、东北虎、大熊猫、麇鹿， 四种不同食性的动物作为研究对象，采集其新鲜粪便进行纯培养放线菌的分 离。此次分离中，经去重复后，获得链霉菌达１２２株。我们对这１２２株链霉菌 进行了抑菌活性、水解酶活性及抗肿瘤活性的评估。其中，分别有２０、１３、 ３０、１５株菌对枯草杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｌｓ）、金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ）、白色念珠菌（Ｃａｎｄｉｄａ ａｌｂｉｃａｎｓ）、黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎｉｇｅｒ）有抑 制作用，抑制率分别达１６．４％、１０．７％、２４．６％、１２．３％：有３２．８％（４０株）的 菌株能够水解毛发，而水解纤维素的只有２株菌，占１．６％；我们用Ｋ５６２细胞 （人慢性髓系白血病）对１２２株链霉菌进行了抗肿瘤活性的初筛，抑制率大于 ５０％的菌株高达５８株，占初筛菌株数的４７．５％。尔后，我们又选取抑制率大于 ４０％的７０株菌进行了抗Ａ５４９细胞（人肺腺癌细胞株）和Ｒａｊｉ细胞（人Ｂ淋巴 瘤细胞株）活性筛选，其平均抑制率分别为３４．７％和２８．５％。 本次研究表明，肠道中蕴藏着数量巨大的放线菌资源，尤其是链霉菌资 源。以上的活性检测是我们对肠道链霉菌有了初步的认识，其不但数量和种类 庞大，而且活性多样性也十分丰富。因此我们应将肠道作为一类“特殊的生 １８８ 第八届全国微生物学青年学者学术研讨会 境”，从中挖掘可供开发利用的资源一一肠道放线菌，进而为获得一些宝贵的毒 性小的活性化合物提供有价值的菌种资源。 脑膜炎球菌Ｂ群减毒外膜微泡疫苗的研究 李晓晶高丹丹毕研伟孙振璐戴宗祥李智华李健峰”徐维明 （中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所昆明６５０１１８） 通讯作者，电子邮箱：！ｉｊｉ垒旦！曼旦ｇＺ≥鱼ｇ堡垒ｉ！：曼Ｑ巴 摘要：脑膜炎球菌多糖疫苗的使用有效的预防了细菌性脑膜炎的发生。但 与脑膜炎球菌Ａ、Ｃ、Ｙ、Ｗ１３５群不同，Ｂ群脑膜炎球菌（ＭｅｎＢ）的荚膜多糖 结构与人体正在发育的神经组织及少数成熟组织中的神经细胞黏附分子同源， 因此不能激发有效的保护性免疫。国内外主要针对外膜微泡０ＭＶ及天然的外膜 微泡ＮＯＭＶ来进行Ｂ群脑膜炎球菌疫苗的研究。其中ＮＯＭＶ包括完整的和处于 自然构象的外膜蛋白ＯＭＰ和脂多糖ＬｏＳ，因此具有很好的免疫原性，但是由 于其ＬＯＳ毒性限制了其使用。 本研究通过基因敲除ＭｅｎＢ中ＬＰＳ合成途径相关基因ｌｐｘＬｌｆｌｐｘＬ２和 ● ＳｙｒＬＸ的方法，降低ＬＰＳ毒性，获得低毒的ＮＯＭＶ，以使其能更好的用于系统 性免疫。本研究成功获得了ＩｐｘＬｌ／１ｐｘＬ２和ＳｙｎＸ缺失的ＭｅｎＢ，提取减毒 ＮＯＭＶ组分后，进行ＬＰＳ毒性分析，发现减毒的ＮＯＭＶ刺激单核细胞释放 ＴＮＦ－ａ的量远低于野生型ＮＯＭＶ，说明其毒性较野生型要低；同时，以野生 型ＮＯＭＶ疫苗为对照免疫小鼠后，分别测定血清中特异ＩｇＧ、ＩｇＭ抗体和血 清杀菌抗体含量，证实了减毒ＮＯＭＶ疫苗有较好的免疫原性，能激发小鼠产 生有效的免疫应答。此项研究为Ｂ群脑膜炎球菌疫苗的开发奠定了基础。 关键词：脑膜炎球菌外膜微泡脂多糖 ｌ ８９ 一 一