实验一光学显微镜、微量吸管及改良牛鲍计数板使用课程介绍.pptVIP

【目的】 掌握显微镜的操作规程；了解光学显微镜的结构及原理；了解显微镜的保养方法。 机械部分 1．镜筒是一个金属长筒，筒口上端安装目镜镜 头，下端装有镜头转换器和物镜镜头。2．镜头转换器是安装在镜简下端的一个旋转圆盘。镜头转换器上有3--5 个孔，分别装有低倍或高倍物镜镜头。3．粗准焦螺旋位于镜臂的下方，可以转动，以便使载物台能上下移动，从而调节焦距。4．细准焦螺旋位于粗准焦螺旋外方，它的移动范围较粗准焦螺旋小，可以细调焦距。5．镜座位于镜臂下方，用以稳固和支持镜身。 5．镜座位于镜臂下方，用以稳固和支持镜身。6.镜臂上接镜筒，下连载物台，呈弓曲形。为显微镜上的手握之处。7．载物台是放置玻片的平台。其中央具有通光孔，载物台上有金属夹片夹，是用来卡住载玻片的夹子，转动左、右移动尺螺旋还可使切片在载物台上移动。 光学部分 1．目镜是插在镜筒顶部的镜头，是由一组透镜组成的，它可以使物镜成倍地分辨、放大物像，例如 5×、10×、15×和20×。2．物镜安装在物镜转换器的孔上，也是由一组透镜组成的，能够把物体清晰地放大。物镜上刻有放大倍数，例如 （4、10、25、40、100×）等。显微镜的放大倍数是目镜倍数乘以物镜的倍数。3．底光源位于底座上，开关位于底座侧方。光线的强度可以调节。 一、使用方法 2．低倍镜观察。 3．高倍镜观察； 4．油镜观察： （1）上升聚光器，全开虹彩光圈 （2）用粗调节轮提起镜筒或下降载物台，转动转换器将油镜转至镜筒正下方。在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。右手顺时针方向慢慢转动粗调节轮使镜筒下降或载物台上升，与此同时，从显微镜的侧面观察使油镜浸入油中，直到几乎与标本接触时为止。注意不要压到标本，以免压碎玻片，甚至损坏油镜头。 （3）从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节轮将镜筒徐徐上升或将载物台徐徐下降，直到视野内出现物像为止，然后用细调节轮校正焦距。如油镜已离开油面而仍未见物象，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物象看清为止。 ５．换片 观察完一个标本后，如果想要再观察另一标本时，需先将高倍物镜（或油竟镜）转回到低倍物镜，取出标本，按放片的方法换上新片，即可观察。千万不可在高倍物镜（或油竟镜）下换片，以防损坏镜头。 　 1．拿取显微镜必须一只手拿着镜臂，一只手托着镜座，并保持镜身的上下垂直，应避免震动，轻放台上。切不可一只手提起，以防显微镜、反光镜功目镜坠落。 2．使用前应将镜身擦拭一遍、用擦镜纸将镜头擦净（切不可用手指擦抹）。若遇到镜台或镜头上有干香柏油，可用擦镜纸沾取少量二甲苯将其擦去。 3．使用时如发现显微镜操作不灵活或有损坏，不要擅自拆卸修理，应立即报告指导教师处理。 （一）目的、原理、实验用品、标本 1、目的：掌握微量吸管的实验方法。 2、原理：挤压乳胶头使微量吸管产生负压而吸取液体。 3、实验用品： 一次性微量吸管、带孔乳胶吸头、试管、2ml吸管、NS等。 4、标本：新鲜抗凝血 （二）操作方法 1、准备吸管 将带孔的乳胶吸头套在微量吸管上，连接处应严密不漏气。 2、加稀释液 取试管1支，加生理盐水2ml. 3、持管吸血 右手拇指和中指夹住吸管及吸头交接处，示指盖住吸头小孔，三个指头轻微用力，排出适量的气体使管内形成较小的负压，将管尖插入抗凝血，三个指头慢慢松劲，吸取抗凝血到所需刻度后，抬起示指，注意管尖始终不要离开液面，以免吸入气泡，也不要过度用力将血液吸入乳胶吸头。 （三）注意事项 1、操作步骤3需反复练习才能准确吸取血液到所需量。 2、一次吸取血液到所需的量，吸管内不能有空节也不能吸取血液过多，最好不要超过所需刻度的±2mm. 3、稀释血液前一定要拭净管外余血，释放血液时的动作不能太剧烈，避免破坏血液成分或不能利用上清液将管内血液洗净。 （四）实验评价 微量吸管使用是手工法血细胞分析的第 一步，有很多因素影响检验结果的准确性和精确度，如一次性吸管的质量、操作者的技术熟练程度和责任心等。 三、改良牛鲍计数板的使用 （一）目的：掌握改良牛鲍计数板结构及使用方法。 （二）原理：一定倍数稀释的血液或体液混匀后滴入具有固定体积和精密划分刻度的改良牛鲍计数板中，在显微镜下对所选择的区域中的细胞进行计数，在乘以稀释倍数，即可换算成单位体积内的细胞数。 （三）、实验用品 1、器材 改良牛鲍计数板、专用盖玻片、光学显微镜、绸布、微量吸管、带孔乳胶吸头、刻度吸管、试管。 2、试剂 红细胞稀释液 （四）标本：抗凝血 五、操作 1、稀释血液 取试管1支，加红细胞稀释液2ml,加抗凝血10微升，立即混匀，制成红细胞悬液。 2、准备计数板 用绸布拭净改良牛鲍计数板和专