基因工程及其应用课件超好.ppt

不同物种特征的结合 基因工程：即 。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里， 地改造生物的 。 什么是粘性末端？ 被限制酶切开的DNA两条单链的切口，带有几个伸出的核苷酸，它们之间正好互补配对，这样的切口叫黏性末端。 基因工程的基本操作步骤： 坐上那~大~奔~去拉萨…come on ，go！go，go！ 谁能告诉我这是ＷＨＡＴ？ 糖尿病的根本原因？ 糖尿病的跟本原因在于胰腺B细胞分泌的胰岛素不足或分泌胰岛素受阻引起的。 治疗糖尿病的措施？ 每月需3支，每支86元，每月需要258元左右不等 胰岛素的早期提取方法： 每100kg 猪或牛的胰腺中提取 4~5g胰岛素 1979年，利用大肠杆菌的DNA分子重组，2000L培养液 提取100g ， 相当于2吨猪胰腺中提取的量 大肠杆菌-----细菌 特点：生长繁殖快 问题探讨 讨论： 1、为什么要把人的基因“嫁接”到细菌上？ 2、怎样把人胰岛素基因“嫁接”到大肠杆菌中去？ 2、原理： 1、操作水平： 基因重组 DNA分子水平 基因拼接技术或DNA重组技术 定向 遗传性状 3、基因工程育种与杂交育种、诱变育种相比，主要优点是什么？ 目的性强、育种周期短、克服远源杂交不亲和的障碍 一、基因工程 （二）基因操作的工具 基因的“剪刀” 限制性核酸内切酶 基因的“针线” DNA连接酶 基因的运输工具 运载体 1、基因工程的 指“ 限制性核酸内切酶 ” 主要存在于微生物 一种限切酶只能识别一种特定的核苷酸序列,并在特定切点切割DNA分子 已发现的有200多种 种类: 来源: 特点: “ ” 作用于： 磷酸二酯键 A G C T A G C T P 脱氧 核糖 P P P 脱氧 核糖 脱氧 核糖 脱氧 核糖 （1）DNA分子是由两条反向平行的脱氧核苷酸链盘旋成双螺旋结构。 脱氧核苷酸链 脱氧核苷酸链 脱氧 核糖 P 脱氧 核糖 P 脱氧 核糖 P 脱氧 核糖 P 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG EcoRI 剪切目的基因 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 目的基因 黏性末端 　　被同一种限制酶切断的两个DNA是否具有相同的黏性末端？ 思考: 形成的黏性末端不同 不同的限制酶呢？ 具有 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT GGCATCTTAA AATTCCGTAG 2、基因工程的 DNA连接酶 作用： 将互补配对的两个粘性末端连接起来，使之成为一个完整的DNA分子 针线： 甲片段 CTTCATG AATTCCCTAA GAAGTACTTAA GGGATT 乙片段 GGCATCTTAA AATTCCGTAG GGCATCTTAA AATTCCGTAG DNA连接酶的作用位点是：相邻的两个脱氧核苷酸的切口。即生成：磷酸二酯键。 2、基因工程的 “ ” 3、基因的运载体 （2） 条 件 ①能够在宿主细胞中复制并稳定地保存 ②具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 ③具有标记基因，便于进行筛选 （3）常用 的运载体： 质粒、噬菌体和动、植物病毒等 （1）运载体的概念 标记基因，便于进行检测。 质粒存在于许多细菌和酵母菌等生物中,是能够自主复制的很小的环状DNA分子。　 四步曲： 1、提取目的基因 2、目的基因与运载体结合 3、将目的基因导入受体细胞 4、目的基因的检测和表达 第一步： 三、基因工程基本步骤： 第二步： 获取目的基因 目的基因与运载体结合 方法： 1、直接分离：鸟枪法 2、人工合成: 注意：要保持基因的完整性 注意：要用同一种限制酶切取目的基因和运载体，并用DNA连接酶连接。 第三步： 第四步: 将目的基因导入受体细胞 目的基因的检测和表达 1、常用的受体细胞： 大肠杆菌