第3章细菌与环境资料.pptVIP

噬菌体的应用 分子生物学研究的重要工具 噬菌体基因数量少，结构比细菌和高等细胞简单得多，而且容易获得大量的突变体。 λ噬菌体可用来构建基因文库 基因工程载体 噬菌体展示技术 噬菌体的应用 细菌感染的诊断与治疗 应用噬菌体效价增长试验可检测标本中的相应细菌。在怀疑有某种细菌存在的标本中，加入一定数量的已知噬菌体，37℃孵育6~8h，再测定该噬菌体的效价。 辅助治疗，如应用铜绿假单胞菌噬菌体治疗创口感染。 THE END 谢谢大家！ 紫外线和电离辐射 日光暴晒：直射暴晒6h 适用于书籍、被服、床垫等 紫外线消毒：杀菌作用最强波段265-266nm 用于室内空气消毒时，有效距离不超过2m，照射时间不少于30min 适用于物体表面及空气的消毒 电离辐射：杀菌机制是破坏菌体的DNA 适用于不耐热的医用塑料制品的消毒 紫外线杀菌机制： 作用于微生物的DNA,使菌体DNA失去转化能力而死亡 破坏菌体蛋白质中的氨基酸，使菌体蛋白光解变性 降低菌体内氧化酶的活性 使空气中的氧电离产生具有极强杀菌作用的臭氧 其他物理因素 滤过 其他物理因素 超声波 其他物理因素 干燥 三、化学因素对细菌的影响 具有消毒作用的化学药物称为消毒剂 对细菌和机体都有毒性，故只能外用 化学因素对细菌的影响 类型 作用机制 常用种类 酚类 蛋白质变性，细胞膜损伤 石炭酸 醇类 蛋白质变性与凝固 乙醇 氧化剂 氧化作用、蛋白质凝固 高锰酸钾、碘酒 过氧乙酸、 重金属盐 氧化作用、蛋白质变性 与凝固 红汞、硫柳汞 表面活性剂 蛋白变性，细胞膜损伤 新洁而灭 染料 抑制繁殖 龙胆紫 酸碱类 破坏膜、壁，蛋白凝固 醋酸、生石灰 烷化剂 蛋白质及核酸烷基化 环氧乙烷 影响消毒灭菌效果的因素 消毒剂的性质、浓度与作用时间 微生物的种类、状态与数量 消毒剂相互间的作用 环境中有机物的存在 四、噬菌体 噬菌体的概念 噬菌体(bacteriophage, phage)是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的病毒的总称，因部分能引起宿主菌的裂解，故称为噬菌体。 病毒的特性： 个体微小，可以通过细菌滤器 没有完整的细胞结构，由蛋白质和核酸组成 专性细胞内寄生的微生物 分布极广 有严格的宿主特异性 生物学性状 形态 个体小，需用电子显微镜观察 蝌蚪形、微球形和细杆形，大多数呈蝌蚪形。 生物学性状 结构 大多数噬菌体呈蝌蚪形，由头部和尾部两部分组成。 头部呈六边形立体对称，由蛋白质衣壳包绕核酸组成；尾部是一管状结构，由中空的尾髓和外面包裹的尾鞘组成，尾髓具有收缩功能，可将头部的核酸注入宿主菌；尾部末端上有尾板、尾刺和尾丝；头部和尾部连接处有尾领、尾须结构。 噬菌体的生物学性状 化学组成 蛋白质 构成噬菌体的头部的衣壳及尾部，包括尾髓、尾鞘、尾板、尾刺和尾丝，起着保护核酸的作用，并决定噬菌体外形和表面特征。 核酸-遗传物质 基因组大小2~200Kb 核酸为DNA或RNA，大多数噬菌体的DNA为双链DNA，但一些微小DNA噬菌体的DNA为环状单链。多数RNA噬菌体的RNA为线状单链，少数为线状双链，且分成几个节段。 噬菌体的生物学性状 抗原性 噬菌体具有抗原性，能刺激机体产生抗体。该抗体能抑制相应噬菌体侵袭敏感细菌，但对已吸附或已进入宿主菌的噬菌体不起作用，噬菌体仍能复制增殖。 噬菌体的生物学性状 抵抗力 比一般细菌的繁殖体强 抵抗乙醚、氯仿和乙醇 75℃ 30min或更久才能被灭活 耐受低温和冰冻 但对紫外和X射线敏感，一般经紫外照射 10~15min即失去活性。 毒性噬菌体 毒性噬菌体(virulent phage) 能在宿主菌细胞内复制增殖,产生许多子代噬菌体，并最终裂解细菌，称为毒性噬菌体。 温和噬菌体(temperate phage) 噬菌体基因与宿主菌染色体整合，不产生子代噬菌体，但噬菌体DNA能随细菌DNA复制，并随细菌的分裂而传代，称为温和噬菌体或溶原性噬菌体(lysogenic phage)。 毒性噬菌体 增殖过程 吸附 穿入 生物合成 成熟与释放 毒性噬菌体 吸附 是噬菌体与细菌表面受体特异性结合的过程，特异性取决于噬菌体蛋白与宿主菌表面受体分子结构的互补性。 吸附方式 丝形噬菌体以其末端吸附，有尾噬菌体以尾丝、尾刺吸附。 丝形噬菌体如M13，f1等及微球形噬菌体如MS2等是吸附在性菌毛上，所以只感染有性菌毛的F+菌。 只要细菌有特异性受体，不论死活噬菌体都能吸附，但噬菌体不能进入死亡的宿主菌。 毒性噬菌体 穿入 有尾噬菌体吸附宿主后，借助尾部末端含有的一种类似溶菌酶的物质，在细菌细胞壁上溶一小孔，然后通过尾鞘的收缩，将头部DNA注入细菌体内，而蛋白衣壳留在菌细胞外。 无尾噬菌体与丝形噬菌体可以脱壳的方式进入细菌细胞内。 毒性噬菌体 毒性噬菌体 生物合成 转录形成