发酵工程培养基设计概述.ppt

四、生长因子、前体和产物促进剂 从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。 1、生长因子 如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型，以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重要的作用 。 以谷氨酸为例 生物素是B族维生素，影响细胞膜的透性 生产上常用的生物素来源的原料及其生物素含量（ug/kg） 玉米浆 180 干酵母 600~1800 豆饼水解液 120 甘蔗糖蜜 1200 麸皮 200 米糠 270 甜菜糖蜜 53 有机氮源是这些生长因子的重要来源，多数有机氮源含有较多的B簇维生素和微量元素及一些微生物生长不可缺少的生长因子 。 前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。 2、前体 青霉素：分子量356 苯乙酸:分子量136 苯乙酸及其衍生物是青霉素的前体物质。 用法：前体使用时普遍采用流加的方法 前体一般都有毒性，浓度过大对菌体的生长不利 . 苯乙酸，一般基础料中仅仅添加0.07%. 前体相对价格较高，添加过多，容易引起挥发和氧化，流加也有利于提高前提的转化率. 3、产物促进剂 促进剂提高产量的机制还不完全清楚，其原因是多方面的。 有些促进剂本身是酶的诱导物； 有些促进剂是表面活性剂，可改善细胞的透性，改善细胞与氧的接触从而促进酶的分泌与生产， 也有人认为表面活性剂对酶的表面失活有保护作用； 有些促进剂的作用是沉淀或螯合有害的重金属离子。 五、水 水源质量的主要考虑参数包括pH值、溶解氧、可溶性固体、污染程度以及矿物质组成和含量。 对于常规发酵，可靠、持久，能提供大量成分一致清洁的水。 种子培养基发酵培养基一般采用深井水或自来水。 第二节 培养基的类型 培养基按其组成物质的纯度、状态、用途进行分类。 一、按纯度 合成培养基( synthetic medium ) : 原料其化学成分明确、稳定 。 适合于研究菌种基本代谢和过程的物质变化规律。 培养基营养单一，价格较高，不适合用于大规模工业生产。 天然培养基( complex medium ) : 采用天然原料 原料来源丰富(大多为农副产品)、价格低廉、适于工业化生产。 原料质量等方面不加控制会影响生产稳定性。 半合成培养基 ( semi － synthetic medium ) 采用一部分天然有机物作碳源、氮源和生长因子的来源，再适当加入一些化学药品以补充无机盐成分，使其更能充分满足微生物对营养的需要。 M培养基(1L)： Na2HPO4 6g，KH2PO4 3g， NaCl 0.5g， NH4Cl 1g， MgSO4.7H2O 0.5g， CaCl2 0.011g，葡萄糖 2-10, pH 7.0 。 YPS培养基：酪蛋白胨（日本大五营养）10g，酵母提取物（英国Oxoid）5g, NaCl 10g，PH 7.2 培养大肠杆菌常用两种培养基 二、按状态 固体培养基 : 半固体培养基:即在配好的液体培养基中加入少量的琼脂，一般用量为0.5%～0.8% ,主要用于微生物的鉴定。 液体培养基: 三、按用途（从发酵生产应用考虑） 培养基按其用途可分为孢子（斜面）培养基、种子培养基和发酵培养基三种 。 选择性培养基、鉴别培养基、富集培养基等 生理代谢 菌种筛选 种子培养 发酵培养 不同的制糖工艺生产的糖液质量差别很大 淀粉制糖过程考察指标 葡萄糖值——DE值(dextrose equivalent value) DX值 糖化液中葡萄糖含量占干物质的百分率为DX值。 不用加工方法对甘蔗糖蜜的影响 糖蜜使用的注意点： 除糖份外，含有较多的杂质，其中有些是有用的，但是许多都会对发酵产生不利的影响，需要进行预处理。 例：谷氨酸发酵 有害物质：胶体成分（起泡、结晶）、钙盐（结晶）生物素（发酵控制） 预处理：澄清→脱钙→脱除生物素 例：柠檬酸发酵 有害物质：铁离子含量高（导致异柠檬酸的生成） 用亚铁氰化钾，除铁。 谷氨酸发酵中糖蜜的预处理 谷氨酸发酵中，使用生物素缺陷型菌株，发酵培养基中的生物素为5 μg／L左右，而糖蜜中特别是甘蔗糖蜜中的生物素含量为1～10 μg／g，显然不适合谷氨酸的发酵。 一般有活性炭处理法、树脂法以吸附生物素；用化学药剂拮抗生物素或使用