半连续发酵概念.doc

第六章 发酵动力学 学时安排：6学时 教学目的与要求： （1）了解发酵动力学研究的基本内容，掌握其中的基本概念； （2）掌握细胞生长、基质消耗、产物合成的物料衡算； （3）掌握MONOD方程及其参数的求解； （4）掌握分批发酵、连续发酵及补料分批发酵的特性。 重点及难点：细胞生长、基质消耗、产物合成的物料衡算；MONOD方程的灵活运用及发酵动力学参数求解。 什么是发酵动力学？ 发酵动力学：研究微生物生长、产物合成、底物消耗之间动态定量关系，定量描述微生物生长和产物形成过程。 主要研究： 1、发酵动力学参数特征：微生物生长速率、发酵产物合成速率、底物消耗速率及其转化率、效率等；2、影响发酵动力学参数的各种理化因子；3、发酵动力学的数学模型。 认识发酵过程的规律 优化发酵工艺条件，确定最优发酵过程参数，如：基质浓度、温度、pH、溶氧，等等； 提高发酵产量、效率和转化率等。 一、分批发酵动力学 分批发酵：准封闭培养，指一次性投料、接种直到发酵结束，属典型的非稳态过程。 分批发酵过程中，微生物生长通常要经历延滞期、对数生长期、衰减期、稳定期（静止期）和衰亡期五个时期。 微生物细胞群体生长动力学是反映整个群体的生长特征，而不是单个微生物生长倍增的特征。因此，菌龄是指一个群体的表观状态。 ※分批发酵动力学 （2）培养液中有抑制物情形 ① 高浓度基质抑制存在情况下： 二、连续发酵动力学 （一）发酵装置 （1）连续发酵概念：在发酵过程中，不断向发酵罐（反应器）流加培养基，同时以相同流量从发酵罐（反应器）中取出培养液。 （2） 类型及装置 ① 罐式连续发酵 单级、多级串联、细胞回流式。 ② 塞流式连续发酵 ③ 罐式连续发酵实现方法 A．恒浊法：通过调节营养物的流加速度，利用浊度计检测细胞浓度，使之恒定。 B．恒化（器）法：保持某一限制性基质在一恒定浓度水平，使菌的比生长速率μ保持一定 （二） 连续发酵（培养）理论 1.单级恒化器连续发酵 （1）概念 定义：① 稀释率D=F/V （h-1） F—流量（m3/h） V—培养液体积（m3） 3. 进行细胞回流的单级连续发酵（细胞再循环的单级连续发酵） （1）装置（概念） 概念：进行单级连续培养时，可以把从发酵罐流出的培养液进行分离，经浓缩的细胞悬浮液被送回发酵罐中。 优点：提高了发酵罐中的细胞浓度，也有利于提高系统的操作稳定性。 α：再循环比率（回流比） C：浓缩因子（分离器中细胞的浓缩倍数） （2）μ与D的关系 细胞的物料衡算： 积累的细胞=进入培养液中的细胞+再循环流入的细胞-流出的细胞+生长的细胞-死亡的细胞 4. 连续发酵理论的应用 1. 有助于了解和研究细胞生长、基质消耗和产物生成的动力学规律，从而优化发酵工艺。 2．便于研究细胞在不同比生长速率下的特征。 3. 利用细胞再循环连续发酵技术进行废水的生化处理。 4. 利用连续培养的选择性进行富集培养菌种选择及防污染处理。 5.遗传稳定性研究 6．连续发酵提高生产率 5．选择适当的物质作为限制性基质，可使连续培养中细胞代谢产物的生产大大提高。 连续培养也有一些缺点： ① 在长时间发酵中，菌种易于发生变异，并容易染上杂菌； ② 如果操作不当，新加入的培养基与原有培养基不易完全混合。 三 补料分批发酵动力学 补料分批发酵概念：在发酵过程中不断向发酵罐内加入培养基，但不同时取出发酵液的发酵方式，它是一种介于分批发酵和连续发酵之间的发酵方式。 特点：由于培养基的加入，发酵液体积不断变化。 重复补料分批培养概念：在发酵过程中每隔一定时间，取出一定体积的发酵液，同时在同一时间间隔内加入相等体积的培养基，如此反复进行的发酵方式。 特点：发酵液体积、稀释率、比生长速率以及其它与代谢有关的参数都将发生周期性的变化。 1．补料分批发酵的类型 就补料方式而言，有连续流加、不连续流加和多周期流加；每次流加又可分为快速流加、恒速流加、指数速率流加和变速流加；从反应器中发酵液体积分，又有变体积和恒体积之分；从反应器数目分类又有单级和多级之分；从补加的培养基成分来区分，又可分成单一组分补料和多组分补料。 2. 补料分批发酵动力学 整个反应器中细胞、限制性基质和产物总量的变化速率可用下式表示： 3．补料分批发酵的优点及应用 ①可以解除底物的抑制、产物反馈抑制和葡萄糖分解阻遏效应。 ②避免在分批发酵中因一次性投糖过多造成的细胞大量生长、耗氧过多、以至通风搅拌设备不能匹配的状况。 ③菌体可被控制在一系列连续的过渡态阶段，可用来作为控制细胞质量的手段。 ④与连续发酵相比，补料分批发酵的优点在于：a.无菌要求低；b.菌种变异，退化少；c.适