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【KS5U推荐】2016年高考生物一轮复习精品资料 专题11.2 植物组织培养技术及DNA和蛋白质技术 Word版含解析
【考情解读】
1.植物的组织培养
.血红蛋白的提取与分离。
.从生物组织中提取某些特定成分。
.实验:DNA的粗提取与鉴定。
【重点知识梳理】
一、菊花组织培养
1.植物组织培养的过程和原理
(1)原理:植物细胞的全能性。
(2)高度分化的细胞全能性表达的条件
①离体状态。
②营养物质:有机营养、无机营养。
③植物激素:生长素、细胞分裂素等。
④无菌、适宜的外界条件。
(3)过程
2.菊花组织培养过程
(1)影响植物组织培养的主要因素
①选材:一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝。
②营养供应
(2)实验操作过程
制备MS固体培养基:配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌
外植体消毒:→→→
接种:始终在酒精灯火焰旁进行,对接种工具要用火焰灼烧
灭菌。将菊花茎段插入培养基中时注意不要倒插
培养与移栽:在18~22 ℃的无菌箱中培养,得到试管苗后
进行移栽
3.影响植物组织培养的主要因素
(1)培养材料
①不同的植物组织,培养的难易程度差别很大,容易进行无性繁殖的植物也容易进行组织培养。
②同一种植物材料,材料的年龄、保存时间的长短对培养也有影响。幼龄、保存时间短的植物材料容易培养成功。
(2)无菌条件
培养基上有细菌等微生物存在时,它们比植物细胞生长、繁殖得更快,而且它们会产生毒素,使培养的植物细胞很快中毒死亡,因此在培养过程中要求进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作。
二、月季的花药培养
1.被子植物的花粉发育过程
?四分体时期?单核期?双核期?花粉粒
2.产生花粉植株的两条途径
3.影响花药培养的因素
(1)主要因素:材料的选择和培养基的组成。
(2)月季花药培养一般选择单核期。
、DNA的粗提取与鉴定
1.基本原理
2.操作过程
材料的选取:选用DNA含量相对较高的生物组织
破碎细胞(以鸡血为例):鸡血细胞,加蒸馏水,用玻璃棒搅
拌,用纱布过滤,收集滤液
去除杂质:利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同,通过控制NaCl溶液的浓度去除杂质
DNA析出:将处理后的溶液过滤,加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为95%的酒精溶液
DNA的鉴定:在溶有DNA的溶液中加入二苯胺试剂,
沸水中加热5 min,溶液变成蓝色
易错警示! (1)本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料,原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。
(2)实验中两次使用蒸馏水,第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液,使DNA从溶液中析出。
(3)二苯胺试剂要现配现用,否则二苯胺会变成浅蓝色,影响鉴定效果。
、PCR技术的基本操作和应用
1.PCR原理
DNA热变性原理,即:
2.PCR反应过程
(1)变性:当温度上升到90_℃以上时,双链DNA解旋为单链。
(2)复性:温度下降到55_℃左右时,两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合。
(3)延伸:温度上升到72 ℃左右时,溶液中的四种脱氧核苷酸(A、T、C、G)在DNA聚合酶的作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA链。
、血红蛋白的提取和分离
1.方法及原理
方法 原理 凝胶色谱法 根据相对分子质量的大小分离蛋白质 电泳法 各种分子带电性质的差异以及分子本身大小、形状的不同 2.血红蛋白的提取和分离过程
、植物有效成分的提取
1.植物芳香油的提取
(1)提取玫瑰精油实验
①方法:水蒸气蒸馏法。
②实验流程
(2)提取橘皮精油的实验
①方法:一般用压榨法。
②实验流程
石灰水浸泡→漂洗→压榨→过滤
橘皮油←再次过滤←静置
2.胡萝卜素的提取
(1)胡萝卜素的性质:不溶于水,微溶于乙醇,易溶于石油醚等有机溶剂。
(2)实验设计
①方法:萃取法,石油醚最适宜作萃取剂。
②实验流程
胡萝卜→粉碎→干燥→萃取
胡萝卜素←浓缩←过滤
(3)鉴定方法:纸层析法。
【高频考点突破】
考点一 植物组织培养与花药离体培养
辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如下图。
(1)图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的________和________过程。
(2)图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是______。培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值________(填“高”或“低”)时,有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时,应采取的灭菌方法是________。
(3)图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是________。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时,常用的酶是______和纤维素酶。
(4)提取辣椒素过程中,萃取加热时需安装冷凝回流装置,其目的是________。
答案 (1)脱分化(或去分化
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