影响沙区葡萄消毒和成苗的因素(修改).doc

宁夏酿酒葡萄秋季消毒技术及其影响成苗因素 郎凤红1，何金柱1，曹孜义2 (1.宁夏农垦西夏王实业有限公司葡萄苗木繁育中心 宁夏 银川 750001. 2.甘肃农业大学生命科学学院 兰州 730000) 摘要：随着我区酿酒葡萄产业的迅速发展，葡萄病毒病已日益蔓延，为有效遏制葡萄病毒病的蔓延，采用茎尖培养和脱毒是一最有效的途径。本文报道了在宁夏秋季多雨季节，通过消毒获得酿酒葡萄无菌外植体技术及其影响成苗的因素进行了分析和探讨。 关键词： 酿酒葡萄；组织培养；消毒；苗木快繁 Ningxia autumn grape seedling disinfection technology and its impact factor LANG fenghong1,HE jinzhu1,CAO ziyi2 （1. Ningxia agricultural reclamation Xixia King industrial Co., LTD grape seedling breeding center，Yinchuan 750001,China;2. Gansu agricultural university college of life science，Lanzhou 730000，China） Key words: Wine grapes；Tissue culture；Disinfection；Rapid propagation of seedlings Abstract: With the regions wine grape industry is developing rapidly, has been growing grapes virus spreading virus to effectively curb the spread of grapes, the use of shoot-tip culture and virus-free is one of the most effective way. This paper reports the fall rainy season in Ningxia, wine grapes obtained by sterile aseptic explants seedling technology and its impact factors are analyzed and discussed. 近年来我国葡萄酒产业发展很快，尤以西部[1][2]。葡萄酒产业是宁夏的优势特色产业，随着这一产业的迅速发展，葡萄病毒病也开始蔓延，严重影响葡萄的产量和品质【3】。为了遏制葡萄病毒病的蔓延，采用茎尖培养和脱毒是一条最有效的途径。茎尖培养和脱毒首先必须要有无菌材料，有关葡萄外植体消毒已有一些报道[1][2][3]，但在风沙大，秋雨多，取材季节晚等不利因素条件下成功获得无菌材料的报道不多，本文对宁夏酿酒葡萄秋季无菌试管苗的获得及其影响葡萄消毒和成苗的因素做以简要报道。 1、材料和方法 1.1材料采集取时间： 分三次采取，时间为： 第一次：8月下旬 第二次：9月上旬 第三次：9月中旬 1.2：供试品种 采取的酿酒葡萄品种有蛇龙珠、赤霞珠、梅鹿辄、霞多丽等。 1.3：采取方法：在各品种园选取长势好、结果好的母株，记下所采植株的位置和该株的生产表现，病虫害和病毒危害情况等。 用酒精棉球擦拭采取用具，从植株上部剪取健壮嫩梢，除去叶片，剪成短于500ml广口瓶的枝条，装入灭过菌的瓶中，一个瓶装入1株，一个株系剪取枝条约20枝。在做好品种株系的标记后，迅速带回实验室，进行消毒处理。 1.4：消毒方法： 采用甘肃农业大学葡萄试管繁殖研究组研制成功的“综合无伤复合消毒法”进行消毒[5][6]。消毒过程如下： 第一步：先将无菌水倒入广口瓶中，并剧烈摇动1分钟，冲洗2次。 第二步：倒入清洁剂（84消毒液，80倍液）摇洗5分钟，无菌水冲洗3次，倒入70%酒精迅速过一下，不超过5秒钟，去酒精，无菌水冲洗2次。 第三步：倒去无菌水，加入0.1‰升汞（内加2%的95%酒精）浸没材料，并剧烈摇动，根据材料老幼确定时间（上部幼嫩枝条时间短，下部较老时间长），0.1‰升汞摇动时间为4-6分钟，。 消毒结束后，在超净工作台上剪去受伤药面，剪取带有1-2芽的茎段接种于装有GS培养基50ml的小三角瓶中。GS培养基配制方法见已有报道[7][8] 。一般每瓶接种一个茎段，接种后，放在光照培养箱中培养，温度为29土1℃培养。 1.5 观察统计方法：[作者简介]郎凤红（1979-），女，助理工程师，任宁夏农垦西夏王实业有限公司葡萄苗木繁育中心技术员，主要负责葡萄苗木繁育技术管理工作。 培养3～7天后，统计污染数，污染按霉菌和细菌分