16免疫学检测技术ok.ppt

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; ; 抗原抗体反应的原理; 一、抗原抗体反应的特点及其影响因素;1.特异性;;网格学说(lattice theory);3.可逆性 亲和力(affimity)与亲合力(avidity) ——抗体抗原之间的结合力大小。 结合力大则亲和力强 ,不易解离,反之则然。;应 用;二、 抗原或抗体的检测方法 ;凝集反应; (一)凝集反应(agglutination);沉淀反应;(二)沉淀反应(precipitation);1、单向免疫扩散(single immunodiffusion):常用于测定IgG、IgM、IgA、C3、C4等。;; 用标记物标记抗体或抗原进行抗原抗体反应借以提高免疫学诊断的敏感性;流式细胞仪;临床应用;2.酶免疫分析(enzyme immunoassay,EIA);9)酶联免疫斑点试验;第二节 免疫分子的 常用检测方法;血清免疫球蛋白的定量测定(IgG、IgM、IgA) 单向免疫扩散、免疫比浊法 ; 第三节淋巴细胞的测定;一、免疫细胞的分离与纯化;细胞免疫功能的检测;二、免疫细胞功能测定;◆ T细胞增生(转化)试验 ◆ T细胞介导的细胞毒试验原理 ◆ T细胞功能的体内检测法 ◆ 流式细胞术 ◆ T分泌细胞因子功能测定; ;放射性测定;①51Cr释放法 ②凋亡细胞检查法:TUNEL法(TdT dependent dUTP-biotin nick end labeling)、FACS测定法;放射性测定;(3)细胞因子检测: 鉴定分离的淋巴细胞亚群,监测某些疾病状态的细胞免疫功能。IL-2、IL-2R、rIFN 、TNF等检测 ①ELISA法 ②生物活性测定法 ③聚合酶链反应(PCR)法; (2)抗体形成细胞测定—— 溶血空斑试验 (hemolytic forming cell assay,HFC)计算HFU/ml;第四节 免疫学检测方法的应用;特异性(specificity) 用该试验检查非患者时出现阴性结果的可能性。 敏感性(sensitivity) 用该试验检查某病患者时出现阳性结果的可能性。 ; 特异性=真阴性/(真阴性+假阳性)×100% 敏感性=真阳性/(真阳性+假阴性)×100%;表 免疫学测定方法敏感性比较;临床应用;本章小结;Thanks

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