发酵工艺中种子扩大培养课件.pptVIP

第四节 种子扩大培养　 一. 种子扩大培养的任务 工业生产规模的增大 需要种子就增多 种子的扩大培养 种子扩大培养的任务，不但要得到纯而壮的培养物，还要获得活力旺盛的、性能稳定、接种数量足够的、纯的培养物。 菌种的活化与种子的扩大培养的区别？; 菌种扩大培养的目的; 二. 种子扩大培养(制备)阶段 实验室种子的制备： 生产车间种子制备: A 实验室种子的制备： e.g 产黄青霉菌(P.chrysogonum) 原始菌种 斜面试管 获得孢子 250ml 茄子瓶（大米或小米） 25 ~28 ℃ ，4~14天 成熟（在真空下抽去水分，使水分含量在10%以下 ，于4 ℃冰箱保存）。;　　 　　对于不产孢子的赤霉素生产菌（Gibberelline fujikuroi），也可用大米固体培养基在茄子瓶中培养菌丝体，用作种子罐种子。 产孢子能力不强或孢子发芽慢的菌种，如产链霉素的灰色链霉菌（S．griseus ），产卡那霉素的卡那链霉菌（S．kanamyceticu），可以用摇瓶液体培养法，孢子接入含液体培养基的摇瓶中，于摇床上培养，获得菌丝体，作为种子。 不产孢子的细菌，如生产谷氨酸的棒状杆菌（Corynebacterium）、短杆菌（Brevibacterium），生产上一般采用斜面营养细胞进行扩培，再转入液体摇瓶培养，获得细胞悬液再接种。; e.g. Glutamic acid-producer：（谷氨酸生产菌） 原始菌种（出发菌种） 固体试管斜面（32 °C ，18~24小时） 三角瓶培养（摇床）(flask culture) 种子罐培养 e.g. 　 yeast： 原始菌种（出发菌种） 10ml 麦汁试管 250ml 三角瓶培养 （27 °C ~28 °C ，3天） （25°C， 2天） 5~10 L卡氏罐 （15 °C ~20 °C ，3~5天）;B：生产车间种子制备： 　　种子罐的作用：使有限数量的孢子(菌体)发芽、生长、并繁殖成大量的菌丝体(菌体)，满足发酵罐的需要（菌体生长和产物形成）。实验室种子进入种子罐有孢子进罐法和摇瓶菌种进罐法。 　　种子罐级数的确定：种子罐级数是指制备种子逐级扩培的次数。 依据：菌种生长特性，孢子发芽及菌体繁殖的速度以及所用的发酵罐的容积。 　　　　种子罐(seeding tank)的级数 　　　　　　　　产物的品种 　　　　　　　　生产规模 　　　　　　　　工艺条件;　　　种子罐级数越少越好，原因： 　 简化生产工艺和控制 　　　减少接种带来的染菌机会 需考虑：尽量延长发酵罐生产产物的时间，缩短由于种子发芽、生产 而占用的非生产时间，以提高发酵罐的生产率［产物／ml·h］。　　 e.g. Glutamate fermentation 一级种子扩培 实验室种子 种子罐 发酵罐 e.g. penicillin fermentation 二级种子扩培 实验室种子 一级种子罐 二级种子罐 发酵罐 e.g.　Streptomycin fermentation 　三级种子扩培 实验室种子 一级种子罐 二级种子罐 三级种子罐 发酵罐 (Streptomyces griseus)－－灰色链霉菌; 　　 种龄与接种量： 　　种龄(seed age)指种子罐培养