大化实验三吸光光度法详解.ppt

第二章 吸光光度法;学习要求; 2.1 光谱分析法概述一、光分析法及其特点;三个基本过程：;二、电磁辐射的基本性质;辐射能的特性：;7;8;三、光分析法分类;1、原子光谱（线性光谱）： 基于原子外层电子跃迁的原子吸收光谱（AAS）； 原子发射光谱（AES）、原子荧光光谱（AFS）； 基于原子内层电子跃迁的 X射线荧光光谱（XFS）； 基于原子核与射线作用的穆斯堡谱；; 2、分子光谱（带状光谱）：;原子光谱为线状光谱， 分子光谱为带状光谱； 为什么分子光谱为带状光谱？;二）、非光谱法： 不涉及能级跃迁，物质与辐射作用时，仅改变传播方向等物理性质；偏振法、干涉法、旋光法等；;光分析法;四、光分析方法的进展; 4. 交叉; 在光谱分析中，依据物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法称为吸光光度法,按所用光的波长不同分为: 红外吸收光谱：分子振动光谱，吸收光波长范围2.5?1000 ?m ,主要用于有机化合物结构鉴定。 紫外吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围200?400 nm（近紫外区） ，可用于结构鉴定和定量分析。 可见吸收光谱：电子跃迁光谱，吸收光波长范围400?750 nm ，主要用于有色物质的定量分析。 本章主要讲授紫外可见吸光光度法。;六、可见吸光光度法特点;2.2 吸光光度法基本原理;;2、物质的颜色; 物质的电子结构不同，所能吸收光的波长也不同，这就构成了物质对光的选择吸收基础。;3、光吸收曲线;吸收曲线的讨论：;吸收曲线的讨论：;二、光的吸收基本定律; 2.朗伯(Lambert)定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。 A∝b ; A＝lg（I0/It)= εb c 式中A：吸光度；描述溶液对光的吸收程度； b：液层厚度(光程长度)，通常以cm为单位； c：溶液的物质的量浓度，单位mol·L－１； ε：摩尔吸光系数，单位L·mol－１·cm－１； 或: A＝lg（I0/It)= a b c c：溶液的浓度，单位g·L－１ a：吸光系数，单位L·g－１·cm－１ a与ε的关系为： a =ε/M （M为摩尔质量） ;5. 朗伯—比耳定律的物理意义 一束平行单色光通过有色溶液，溶液的吸光度与溶液的浓度和厚度成正比，其数学表达式为： A ＝ lg（I0/It) = εb c 朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。应用于各种光度法的吸收测量；; 6.吸光系数 摩尔吸光系数ε在数值上等于浓度为1 mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度； 吸光系数a(L·g-1·cm-1）相当于浓度为1 g/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。;（1）吸收物质在一定波长和溶剂条件下的特征常数； （2）不随浓度c 和光程长度b 的改变而改变。在温度和波长等条件一定时，ε仅与吸收物质本身的性质有关，与待测物浓度无关； （3）可作为定性鉴定的参数； （4）同一吸收物质在不同波长下的ε值是不同的。在最大吸收波长λmax处的摩尔吸光系数，常以εmax表示。εmax表明了该吸收物质最大限度的吸光能力，也反映了光度法测定该物质可能达到的最大灵敏度。 ;（5）εmax越大表明该物质的吸光能力越强，用光度法测定该物质的灵敏度越高。 ε 105：超高灵敏； ε= (6～10）×104 ：高灵敏； ε 2×104 ：不灵敏。 （6）ε在数值上等于浓度为1mol/L、液层厚度为1cm时该溶液在某一波长下的吸光度。;　　7.吸光度A的加和性 ;三、标准曲线;四.偏离朗伯—比耳定律的原因;（1）物理性因素;A; 朗—比耳定律的假定：所有的吸光质点之间不发生相互作用；假定只有在稀溶液(c10-2mol/L)时才基本符合，当溶液浓度c 10-2 mol/L 时，吸光质点间可能发生缔合等相互作用，直接影响了对光的吸收。 故：朗伯—比耳定律只适用于稀溶液。 ;溶液中存在着离解、聚合、互变异构、配合物的形成等化学平衡时。使吸光质点的浓度发生变化，影响吸光度。例： 铬酸盐或重铬酸盐溶液中存在下列平衡： 2CrO42- ＋2H＋