第16章 船长系列：转录后的加工修饰.pptVIP

第 十 六 章;顺式作用元件;真核生物的转录后修饰 Post-transcriptional Modification;02;转录后的修饰;;;几种主要的修饰方式;02;真核生物mRNA转录完成之后，进行加帽加尾剪接等活动。;（一）首、尾修饰;;一 mRNA加工;磷酸水解酶;;一 mRNA加工;阻止降解;1靠近mRNA 3’端有一个加尾信号5’-AAUAAA-3’ 。 2加尾信号下游10-30碱基处有一个5’-CA-3’ 二联体 3二联体的后面有一段富含GU或U的序列;;3’端加上聚腺苷酸尾巴;1. hnRNA 和 snRNA ;真核生物结构基因，由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 ;2. 外显子(exon)和内含子(intron) ;鸡卵清蛋白基因;鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图;mRNA的剪接;;3. 内含子的分类 ;;1;;;;;切哪里-识别;5种RNA和50多种蛋白质参与;—— 除去hnRNA中的内含子，将外显子连接。;A;3 U2snRNP与分支点配对置换BBP和U2AF，但U2只和分支点7个碱基中的6个配对，游离出一个A，且活化状态;U6更容易和5’剪切位点结合，故置换U1。U4也排挤出剪切体;外显子连接 内含子套索含U一起，然后被降解;BBP (branch-point binding protein)和U2AF与分支点结合;U6，U2形成特殊构象，A-2’OH攻击内左;内含子5’端断开;?Modification resulting in the mature mRNA in eukaryotic cells;;;;;;;;;我们有3万基因但10万种蛋白质，可以怎么实现？;;01;01;01;01;01;真核和原核生物转录比较;RNA编辑作用说明，基因的编码序列经过转录后加工，是可有多用途分化的，因此也称为分化加工(differential RNA processing)。;;原核生物mRNA几乎不需要编辑， 就可以进行翻译 但rRNA和tRNA前体需要加工。;原核生物rRNA 转录后的加工;真核细胞有4种rRNA ，其中一种为5SrRNA ，几乎不需要加工。其余3种（18S ，5.8S 和28S rRNA）转录为一条rRNA 前体。前体含有18S ，5.8S ，和28S rRNA 序列各一个拷贝;rRNA修饰酶;四膜虫rRNA的结构;四膜虫rRNA内含子的二级结构;与mRNA和rRNA剪接不同，负责tRNA加工的酶全是蛋白质构成。;tRNA前体;RNaseD;四个亚基组成的核酸内切酶切除内含子（蓝色部分）;tRNA核苷酸转移酶、连接酶;碱基修饰;核酶(ribozyme);一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是 但和酶又有区别，主要表现在两个方面： ①一般的酶是纯的蛋白质，而核酶是RNA 或带有蛋白的RNA。 ②核酶既是催化剂又是底物，随着反应的进行，本身也消失了。而酶却不同，仅催化反应，反应前后其本身的质和量都不发生改变。;;锤头状核酶长约58 个核苷酸，由 三个局部碱基配对的茎区 、 两个单链区和突出的核苷酸构成。该酶可分为3个部分，中间是以单链形式存在的13个保守核苷酸组成的催化核心 ，两侧的茎 区为可变序列，共同组成特异性序列，决定核酶的特异性。;RNA Hammerhead Ribozyme?(Tuschl,1994),;核酶研究的意义;人工设计的核酶;1.一个真核核糖体含有4种不同的rRNA分子和大概82种蛋白质，为什么细胞含有的rRNA基因的拷贝数比核糖体蛋白的基因多 2.总结真核mRNA，tRNA，rRNA转录后修饰 3.剪切体内含子的剪切机制;Indicate the -10 region, the -35 region, and the initiating nucleotide on the sense strand of the E. coli tRNA promoter shown below.