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原位杂交_生物信息等生物技术资料
生物信息学;应用生物信息学解决 科研问题的常规思路;NCBI:National Center for Biotechnology Information ;一、查找并下载文献;;;;;;二、查找目的基因;;;;;三、根据目的基因设计引物;;;;四、测序后序列对比;;;;关于可查找各种信号通路图的3个国外网站 ;蛋白质功能分析及预测;网站和软件推荐;原位杂交;应用;小鼠整体原位杂交所需主要试剂的配置; Solution I: 50% formamide 5X SSC, pH 4.5 ,1% SDS
SolutionII:0.5M NaCl ,10mM Tris-HCl, 0.1%Tween-20
SolutionII加RNaseA .目的是消化未杂交上的RNA.
Solution III: 50% formamide 2X SSC, pH 4.5
Sheep serum: inactivate by heating to 70°C for 30 minutes, store in
aliquots at -20°C.
10X TBS (for 1 liter): 80 g NaCl、 2 g KCl 、250 ml 1M Tris-HCl, pH7.5
;小鼠整体原位杂交所需主要试剂的配置;;一 探针载体的构建;二 RNA探针的合成;胚胎从小鼠体内取出来之后;小鼠胚胎发育过程;原位杂交现在开始了;在PBT中洗3次,每次5分钟;用2 mg/ml 的甘氨酸
溶液处理10分钟
;用PBT配置的4%多聚甲醛和
0.2%的戊二醛重新固定20分钟;杂交后清洗及封闭;颜色反应;;染色质免疫共沉淀(CHIP);应用;一般ChIP的流程 :;将染色质切成小段;取出1平皿细胞(10cm平皿),
加入243 ul 37%甲醛,
使得甲醛的终浓度为1%;除杂及抗体哺育;第二天;第三天;
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