猪THRSP基因启动子SNP及其对基因表达的影响.pdf

万方数据 万方数据 本论文受以下项目资助 国家自然科学基金项目， 安徽省科技攻关（1401032007，12010302052）资助。 This paper is supported by： Natural Science Foundation of China Scientific and technological key projects of Anhui Province （1401032007，12010302052） 万方数据 摘 要 猪肉是中国消费者动物蛋白质来源之一，猪肉品质一直倍受人们的关注。猪肉中 的脂肪及其含量是猪肉品质和风味形成的重要决定因素，决定了猪肉的多汁性和口 感。THRSP 基因参与调控猪肉脂肪沉积，该基因的变异是调节脂肪合成和分解相关 基因表达的关键因素。 本研究以定远猪类群为材料，检测获得 THRSP 基因启动子区 5 个 SNP 位点， 构建了 5 个基因型的双萤光素酶报告基因重组质粒，并与 pRL-CMV 质粒共转染 293T 细胞，利用荧光素酶检测系统对转染细胞进行检测，分析不同基因型启动子的效率， 并通过 THRSP 基因表达的实时荧光定量 PCR 和不同类型猪该基因的频率分布验证 结果，分析启动子 SNP 位点与 THRSP 基因表达之间的关联性。结果表明： 研究所发现的 5 个突变位点分别是位于 CDS 上游的 A-95T、G-98A、A-376G、 T-400C 和 C-459T，并且位于 THRSP 基因的启动子区域。 利用 5 个 SNP 位点的联合基因型构建双萤光素酶报告基因重组质粒，与 pRL-CMV 共转染 293T 细胞，检测其转染后的启动子效率以 TCAGA 联合型最高， TCAGA 的启动效率较 CTGGA 高 129％，CCAGA、CTAGA 和 CTGAT 的启动效率 较 CTGGA 分别低 99％、73.2％和 42.6％。TCAGA 的启动子效率较 CCAGA 高 756 ％，CCAGA 比 CTAGA 低 96.6％。 分析 THRSP 基因的表达水平与不同启动子效率呈显著的相关性（P0.05），并与 瘦肉型猪群和脂肪型猪群这些 SNP 位点的基因频率分布规律一致。可见，THRSP 基 因启动子区的 A-95T、G-98A、A-376G、T-400C 和 C-459T 位点是 THRSP 基因表 达水平差异的关键调控者。 关键词：定远猪；THRSP 基因；SNP；基因表达；脂肪沉积；启动子效率 I 万方数据 Abstract Pork is the source of animal protein of the Chinese consumer who followed with interest for the meat quality. The fat content in pork is an important factor for the formation of quality and flavor, determining the juiciness and taste of pork. Genetic factors regulating th