4第二十章药品的微生物学质量控制_王重振重点.pptVIP

第二十章-药品的微生物学质量控制;学习要求;第一节 药品生产中的微生物污染; 微生物引起的药物变质 存在于药物中的微生物如遇到适宜的条件就能生长繁殖，使药物发生变化，造成药物变质失效 （1）外在表现（味道、气味、色素、沉淀、产气等） （2）判断（外在表现、微生物及其代谢产物检查） （3）药物变质的结果 引起感染 药物失效 微生物有毒代谢产物致病;第二节 药品生产中防止微生物污染的措施;第三节 药品的微生物学检查;薄膜过滤法（首选） ;薄膜过滤法的验证 供试品过滤 ↓ 冲洗液过滤 ↓ 100cfu试验菌过滤 ↓ 滤膜接种于培养基 验证滤膜可截留试验菌，并且试验菌生长不受供试品被截留物的抑制;若供试品有抑菌作用 增加冲洗量 使用中和剂或灭活剂如β-内酰胺酶、对氨基苯甲酸（影响磺胺类抗生素） 更换滤膜品种 ;供试品的无菌检查（薄膜过滤法） 供试品过滤 ↓ 冲洗液过滤 ↓ 滤膜接种于培养基 ↓ 若出现隐约浑浊可染色镜检， 或转种新鲜培养基，或接种斜面培养基;直接接种法 验证 试验菌 ↓ 培养基 ↓ 加入供试品 验证试验菌生长不受供试品抑制;若供试品有抑菌作用 增加培养基的用量 使用中和剂或灭活剂如β-内酰胺酶、对氨基苯甲酸（影响磺胺类抗生素） ;供试品的无菌检查（直接接种法） 供试品 ↓ 培养基 ↓ 若出现隐约浑浊可染色镜检， 或转种新鲜培养基，或接种斜面培养基;二、非灭菌制剂的微生物限度检查 （一）细菌、霉菌及酵母菌计数 平皿法;平皿法的验证 分组 试验组：最低稀释级供试品+100cfu试验菌 菌液组：100cfu试验菌 供试品对照组：最低稀释级供试品 稀释剂对照组：稀释剂+100cfu试验菌 培养基 结果判断 稀释剂对照组÷菌液组×100%≥70% （试验组－供试品对照组）÷菌液组×100%≥70%;若供试品有抑菌作用 供试品溶液性状允许的情况下，尽量选用薄膜过滤法 中和法 培养基稀释法：每1ml的供试品可等量分注多个平皿 离心沉淀法：500转/分钟，离心3分钟，取上清检查 ;供试品的微生物总数测定（平皿法） 不同稀释级供试品 ↓ 培养基 ;薄膜过滤法;薄膜过滤法的验证 分组 试验组：最低稀释级供试品+100cfu试验菌 菌液组：100cfu试验菌 供试品对照组：最低稀释级供试品 稀释剂对照组：稀释剂+100cfu试验菌 流程 供试品过滤，冲洗，试验菌过滤，接种培养基 结果判断 稀释剂对照组÷菌液组×100%≥70% （试验组－供试品对照组）÷菌液组×100%≥70%;若供试品有抑菌作用 中和法 离心沉淀法：500转/分钟，离心3分钟，取上清检查 ;供试品的微生物总数测定（薄膜过滤法） 不同稀释级供试品过滤 ↓ 冲洗液过滤 ↓ 滤膜接种于培养基 ;（二）控制菌检查（非灭菌制剂） （1）大肠埃希菌 分组 验证组：供试液+100cfu试验菌株 阳性对照：100cfu试验菌株 阴性对照：稀释液 检查组：供试液 增菌培养基：胆盐乳糖培养基 鉴定 MUG试验（+）和靛基质试验（+） 单阳性则接种曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂，观察菌落 分离、纯化、镜检、其他鉴定试验;若供试品有抑菌作用 薄膜过滤法 中和法 培养基稀释法 离心沉淀法 ;（2）大肠菌群（埃希菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属） 分组 验证组：供试液+100cfu试验菌株 阳性对照：100cfu试验菌株 阴性对照：稀释液 检查组：供试液（0.1ml、0.01ml、0.001ml） 接种乳糖胆盐发酵管（产酸产气） 接种曙红亚甲蓝琼脂或麦康凯琼脂 菌落特征相符且为革兰阴性无芽孢杆菌，接种乳糖发酵管（产酸产气）;可能的大肠菌群数表;（3）沙门菌 （4）铜绿假单胞菌 （5）金黄色葡萄球菌 （6）梭菌 （7）白假丝酵母菌 ;（三）活螨的检查 一旦检出即判供试品不合格 （四）微生物限度标准（总数、控制菌） 无菌制剂 口服制剂：不得检出大肠埃希菌 含动物脏器：不得检出沙门菌 局部给药制剂：均不得检出金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌 鼻及呼吸道给药制剂：不得检出大肠埃希菌 阴道、尿道给药制剂：不得检出梭菌和白念珠菌 ;谢谢！;无菌检查试验菌株;无菌检查培养基;斜面培养基;无菌检查阳性对照菌;微生物总数测定试验菌株;微生物总数测定培养基;稀释铺板;常见干扰物的中和剂或灭活方法 ;MUG试验;靛基质试验;曙红亚甲蓝琼脂;麦康凯琼脂;乳糖胆盐发酵管