益气化瘀清热方及拆方对大鼠MsC凋亡及泛素化蛋白表达影响研究.pdfVIP

目 录 摘 要 .- 1- Abstract …………………………………………………………………..-2- 前言………………………………………………………………………-4- 实验部分 -6- 实验结果 - 14- 理论探讨 - 19- 结 论 -25- 致 谢……………………………………………………………………-26- 参考文献…………………………………………………………………-27- 附录1 图片……………………………………………………………...-30- 附录2 文献综述………………………………………………………...-31- 附录3 在读期间论文论著和科研情况-36- 万方数据 摘 要 摘 要 目的 对益气化瘀清热方进行拆方，通过观察各类含药血清对脂多糖 （lipopolysaccharide ，LPS ）诱导下体外培养的大鼠肾小球系膜细胞 primary mesangial cells ，MsC 凋亡和凋亡相关蛋白 Bax、Bcl-2 表达，以及泛素化蛋白 表达的影响，探讨益气化瘀清热方对系膜增生性肾小球肾炎治疗的作用机制，比 较不同类中药治疗肾小球肾炎的作用强度。 方法 以体外培养大鼠MsC 为研究对象，利用脂多糖诱导其增生，形成MsC 增 生模型，将造模成功后的MsC 随机分为控制组、模型组、对照组、益气组、化瘀 组、清热组、复方组、雷公藤多甙组，分别加入各类含药血清继续培养，通过 Western-blot 法检测各类含药血清对MsC 凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2 以及泛素化蛋 白表达的影响；采用TUNEL 法检测各类含药血清对MsC 凋亡的影响。 结果 1.益气化瘀清热方及拆方可通过影响Bax、Bcl-2 表达，提高 Bax/Bcl-2 比 率诱导体外培养的大鼠肾小球系膜细胞的凋亡，其中复方组、雷公藤组作用较强， 化瘀组与清热组作用优于益气组 （P 0.05 ）；2.益气化瘀清热方及拆方可降低增生 性肾小球肾炎（MsPGN ）中MsC 泛素化蛋白的表达，复方组作用最强，化瘀组、清 热组作用优于益气组 （P 0.05 ），然两组比较无明显差异 P ＞0.05 。 结论 益气化瘀清热方及拆方后的各类中药可通过促进MsC 凋亡、降低泛素化蛋 白的表达发挥治疗作用，化瘀、清热类药物优于益气类药物，故在MsPGN 的治疗 中应注重活血化瘀、清热解毒法的应用。 关键词 肾小球系膜细胞；益气化瘀清热方；含药血清；凋亡；Bax；Bcl-2； Bax/Bcl-2;泛素化蛋白。 1 万方数据 益气化瘀清热方及拆方对大鼠MsC 凋亡及泛素化蛋白表达影响的研究 The Effects of Yiqi Huayu Qingre party and its separate on rat MsC Apoptosis, expres sion of Ubiquitinated proteins L i Qianqian paidonosology Of Chinese Medicine ） Directed by Zhai Wensheng Abstract Objective: By observing the effects of Yiqi Huayu Qingre party and its separate on Rat mesangial cells apoptosis and apoptosis related genes b ax,bcl-2,as well as the ubiquitinated protein in vitro circumstance stimulated by lipopolysaccharide LPS ， probe the mechanism of Yiqi Huayu Qingre party in the treatment of mesangial proliferative glomerulonephritis MsPGN ,and compare the intensity of acti on of different kinds of traditional Chinese medicine . Methods: The rat MsC stimulated by LPS in vitro circumstance to make the proliferative model was divided randomly into eight equal groups: