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primer5.0知基因序列,设计引物
Primer5.0 目的基因序列引物设计
GATTtCTTGGCTTtATATATCTTGTGGAaAGGaCGAAACACCGTGCTCGCTTCGGCAGCACATATACTAGTCGACGGGTCTAGACAATGATGCTGGGTAATGACACCAAGCTGGGACTGGTACAGAAAGTCAGAGAACACTTACAGAACGGCATCTAGACAATGATGCTGGGTAATACACTTACAGAACGGCATCTAGATGCCGTTCTGTAAGTGTTTGTTGAATGAATGAGTGTTGAACAAACTGCTAAGGTATCTTTACAAGGTAG
从中扩增出目的基因片段(绿色的部分):
首先:将绿色部分复制到primer5.0引物设计软件中,ctrl+v用鼠标右键不管用
.选择As is后,惦记OK出现:
然后惦记,出现
图中右上角标记,其中惦记S合成的是上游引物,A是下游引物,点击S后出现
,然后点击出现
这些就是上游引物,选中后ctrl+c复制到引物合成单中,发给公司,下游引物:回到
点击A出现
用前后调节框,如下,将序列向右移动
移到最后,得到下图
注意显示的是3—5,ctrl+c—ctrl+v后悔发现序列变成5---3了,这是软件的好处,因为公司引物合成就是从5—3的
其实上下游引物只是相对的,将得到的引物序列填表后发给公司就好了
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