五种血小板抗体检测方法的比较和其优化.pdf

—亘拉堡尘拖拉链撞泌壶洼鲍盥轻噩甚煎也 虫奎摘要 流式细胞术很敏感，对于非免疫因素不存在时，用该方法交叉配血可得到很好的试 验结果。虽然这些方法无法鉴定HLA抗原的特异性，但它们的反应强度保证了实验 的敏感性。所有以上的试验方法均比SEPSA方法敏感，而微柱凝胶法有其方便实用 的特点，但其假阳性的问题始终无法很好地解决。经过优化以后可与MASPAT方法 媲美，优化后的方法与原方法比有很大的改善。此外，通过755份样本的检测表明， 苏州地区人群中，A位点抗原频率较高的是A2、A1l、A24、A33，分别是0．3046、 0．2093、0．1695、0．1113，B位点抗原频率较高的是B13、B46、B51、B58、B60、 B62，分别是0．0993、0．1172、0．0748、0．0841、0．0682、0．0775。 结论：通过对5种血小板抗体检测方法的比较，认为MASPAT法、ELISA法和流 式细胞术进行血小板抗体检测的方法均明显优于SEPSA和未改良的MCGT检测法。 MASPAT法与ELISA法的原理相似，只是两者所采用的判读显示形式不同，而灵 敏性可与流式细胞仪检测技术相媲美，用MASPAT法检测多次输血病人中血小板抗 体与文献报道的较接近。微柱凝胶检测法由于其方便简捷的特点越来越受到欢迎， 在红细胞血清学抗体检测方面应用已经非常广泛，因此把它引入到血小板抗体检测 中来就有其必然性。但由于血小板本身有易活化自凝聚的特点，往往影响到其最终 结果的判读。使用血小板保存缓冲液，同时把孵育时间和温度进行适当的调节，杜 绝了假阳性的发生，从而解决了以上所涉及难题，确保了整个检测过程的顺利完成。 微柱凝胶优化方法与MASPAT法检测结果相似，但操作更容易方便，实验时间短， 结果判读直观，重复性较好，所用仪器要求也不高，实验试剂成本较低，值得推广 运用。 由于HLA抗体同种免疫而引起的血小板输注无效的病人通常给予输注HLA匹配 的或经过交叉配血的血小板，通过配合试验以后选择性地输注相容的血小板，可达 到非常好的效果。这种根据病人HLA抗体特异性来选择血小板的方法称为抗体特异 性预测法(ASP)，但是，运用这种策略，对于某些病人来说，相容的血小板并不是 常常能找到。 血小板交叉配血的一个缺点就是配好的血小板保存期只有5天，所以对于需要 垂独查型!堑抗住撞测直萱的}E筮星甚选垡生塞擅要 长期输注血小板的病人来说，交叉配血试验必须经常进行。而用HLA基因位点匹配 的血小板可以有效地减少这方面的问题。然而，HL卜A、B位点匹配的血小板或没有 任何不相容或交叉反应性的on,j,板常常是难以找到的，所以保证血小板供者库中有 足够的供者数就显得非常重要。 鉴于面对这些疑难病例很难找到特别有效的对策和方法，所以采用有效的预防 措施如滤除白细胞或用辐照的方法去除血小板中的白细胞的方法来减少或防止同 种免疫的发生。血小板输注无效是血小板输注过程中一个难以回避的问题，会影响 各种各样不同的病人。它也与疾病的诊断治疗、早期的免疫刺激因素或血液制品的 类型有关。随着去白细胞血液制品的广泛使用，同种免疫引起的血小板输注无效的 发生的几率也许会逐步降低。 关键词：血小板；抗体检测；MASPAT；微柱凝胶；HLA：PCR；输血无效 硕士研究生：周晓华 导 师：张学光 真挫查!j!扳抗然撞到直洼曲}E粒里甚垡生匕 墓奎摘要 Oomparative studies by five methods and modificative appI ication on detection of PIateIet antibodies Abstract Object ve：Improvements in the availability and quality of platelet transfusions have markedly reduced the morbidity and mortality associated with intensive myelosuppressiVe therapy．Transfusion of platelet concentrates(PC)reduced the incidence of fatal hemorrhages in several thromb。cytopenic conditions． Unfortunately，long—term platelet supportive care may be complicated by the development of a state of refractoriness， resulting in inadequate recovery of functional p