【创新设计】2017版高考生物人教版（全国）一轮复习课件：选修三 现代生物科技专题 第35讲 .pptVIP

2.(2015·高考安徽卷，31－Ⅱ)科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。 (1)由过程①获得的A为________。 (2)在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是_________________。受体应选用________期卵母细胞。 (3)进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生_______，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 (4)采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为_______________________________。 解析　(1)在基因工程中，构建重组载体后才能将目的基因导入受体细胞。(2)核移植技术选用的成熟卵母细胞处于减数第二次分裂中期(MⅡ中期)，需去掉细胞核以保证得到的克隆动物的核遗传物质来自于含目的基因的成纤维细胞。(3)胚胎移植时受体动物对移入的胚胎基本不发生免疫排斥反应，这为胚胎的存活提供了可能。(4)由于整合有目的基因的胎儿成纤维细胞具有增殖能力，可进行传代培养，所以理论上可利用动物细胞培养技术和核移植技术，获得无限个转基因绵羊。 答案　(1)含目的基因的重组载体 (2)保证核遗传物质来自含目的基因的成纤维细胞　 MⅡ (3)免疫排斥反应 (4)整合有目的基因的成纤维细胞可进行传代培养 (1)核移植时为何选MⅡ中期卵母细胞？ ①此类细胞体积大，易于操作；②卵黄多，营养物质丰富，可为发育提供充足的营养；③卵母细胞的细胞质中存在激发细胞核全能性表达的物质。 (2)克隆动物是由重组的细胞经培养而来的，该重组细胞的细胞质基因来源于受体细胞，细胞核基因来源于提供细胞核的亲本，其遗传物质来自2个亲本。 (3)核移植中供体动物、提供卵母细胞的动物、代孕动物和克隆动物之间的关系：克隆动物绝大部分性状与供体动物相同，少数性状与提供卵母细胞的动物相同，与代孕动物的性状无遗传关系。 (4)动物体细胞核移植技术(克隆)从生殖方式的角度看属无性生殖，重组细胞相当于受精卵，需要动物细胞培养和胚胎工程技术的支持。 3.微载体是由天然葡聚糖等组成的颗粒，其直径很小，常用于贴壁生长的细胞培养。微载体大规模细胞培养技术已广泛应用于科研生产，其流程图如下。 (1)微载体加入培养罐中后，通过搅动使其保持悬浮状态，这样不仅能让细胞与培养液充分接触,而且便于细胞的________,所以选用的微载体颗粒直径应尽可能小。 (2)图中过程a的处理是________。 (3)培养罐培养所需的条件是___________________________。 (4)在产生单克隆抗体过程中，杂交瘤细胞在加入培养罐前，需进行筛选，其目的是筛选出________的细胞群。 (5)转基因工程和动物细胞培养技术均能用于生产乙肝疫苗，它们的根本区别在于导入的受体不同，前者是导入能高效快速表达的________，而后者是导入仓鼠卵巢细胞。 答案　(1)生长繁殖和代谢　(2)用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理　(3)无菌、无毒环境，营养物质，适宜的温度和pH及气体环境　(4)未融合的细胞和融合的具有同种核的细胞　(5)受精卵 动物细胞融合与单克隆抗体制备的归纳 (1)制备单克隆抗体时选用一种抗原处理的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生杂交瘤细胞，杂交瘤细胞兼有两个亲本细胞的特性——在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生出某种特异性的抗体。 (2)进行动物细胞的诱导融合，形成的杂种细胞有三种：AA型、BB型、AB型。只有AB型才是我们所需要的杂种细胞，所以需要用选择性培养基进行筛选。 (3)单克隆抗体制备过程中的两次筛选 第一次筛选：利用特定选择培养基筛选，获得杂交瘤细胞，即AB型细胞(A为浆细胞，B为骨髓瘤细胞)，筛选掉A、B、AA、BB型细胞。 第二次筛选：利用多孔板法和抗原—抗体杂交法筛选，获得产生特定抗体的杂交瘤细胞。 易错易混　防范清零 [易错清零] 易错点1　不清楚动物细胞培养时，为何使用胰蛋白酶而不使用胃蛋白酶 点拨　进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。分散细胞时不能用胃蛋白酶，因为胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.8。胰蛋白酶作用的适宜pH为7.2～7.8，而多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4。 易错点2　混淆原代培养与传代培养 点拨　(1)原代培养：细胞悬液第一次在瓶中培养，没有分瓶培养之前的细胞培养。 (2)传代培养：原代培养的细胞生长、繁殖一定时间后，由于空间不足或细胞密度过大导致接触抑制影响细胞的生长，因此需要重新用胰蛋白酶等处理，进行分瓶扩大培养，即传代培养。 易错点3　误认为动物细胞培养液中加入5%CO2的目的是维持气体平衡或用于呼吸 点拨