第五章微生物的生长繁殖与控制要点.ppt

第五章 微生物的生长繁殖 与控制 生物个体由小到大的增长，即表现为细胞组分与结构在量方面的增加 生长 指生物个体数目的增加 繁殖 由于微生物的个体极小，所以常用群体生长来反映个体生长的状况 个体生长?个体繁殖? 群体生长 群体生长 = 个体生长 + 个体繁殖 个体生长——微生物细胞个体吸收营养物质，进行新陈代谢，原生质与细胞组分的增加为个体生长。 群体生长——群体中个体数目的增加。可以用重量、体积、密度或浓度来衡量。 第一节 微生物分离和纯培养 平板划线分离法 稀释倒平板法 单孢子或单细胞分离法 利用选择性培养基分离法 纯培养(pure culture)：微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁殖而得到的后代，称纯培养。 1.平板划线分离法 用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线 ，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 2.稀释倒平板法 3. 单孢子或单细胞分离法 采取显微分离法从混杂群体中直接分离单个细胞或单个个体进行培养以获得纯培养 。 在显微镜下使用单孢子分离器进行机械操作，挑取单孢子或单细胞进行培养。也可以采用特制的毛细管在载玻片的琼脂涂层上选取单孢子并切割下来，然后移到合适的培养基进行培养。 4. 选择性培养基分离法 各种微生物对不同的化学试剂、染料、抗生素等具有不同的抵抗能力，利用这些特性可配制合适某种微生物而限制其它微生物生长的选择培养基，用它来培养微生物以获得纯培养。 微生物纯培养分离方法的比较 第二节 微生物的生长规律 一、细菌群体生长规律 在不补充营养物质或移去培养物，保持整个培养液体积不变条件下，以时间为横坐标，以菌数为纵坐标，根据不同培养时间时细菌数量的变化，可以作出一条反映细菌在整个培养期间菌数变化规律的曲线。 生长曲线 生长曲线可分： 延滞期 对数期 衰亡期 稳定期 1. 延滞期 将少量菌种接入新鲜培养基后，在开始一段时间内菌数不立即增加，或增加很少，生长速度接近于零，也称延迟期、适应期。 特点：分裂迟缓、代谢活跃 ①通过遗传学方法改变种的遗传特性使迟缓期缩短； ②利用对数生长期的细胞作为“种子”； ③尽量使接种前后所使用的培养基组成不要相差太大； ④适当扩大接种量等方式缩短迟缓期，克服不良的影响。 2. 对数期 对数生长期的细菌个体形态、化学组成和生理特性等均较一致，代谢旺盛、生长迅速、代时稳定，所以是研究微生物基本代谢的良好材料。它也常在生产上用作种子，使微生物发酵的迟缓期缩短，提高经济效益。 以最大的速率生长和分裂，细菌数量呈对数增加。细菌内各成分按比例有规律地增加，表现为平衡生长。 3. 稳定期 由于营养物质消耗，代谢产物积累和pH等环境变化，逐步不适宜于细菌生长，导致生长速率降低直至零(即细菌分裂增加的数量等于细菌死亡数量)，结束对数生长期，进入稳定生长期。 原因： 获得更多的菌体物质或代谢产物采取措施： 补充营养物质或取走代谢产物或改善培养条件，如对好氧菌进行通气、搅拌或振荡等 4. 衰亡期 细菌代谢活性降低，细菌衰老并出现自溶，产生或释放出一些产物，如氨基酸、转化酶、外肽酶或抗生素等。细胞呈现多种形态，有时产生畸形，细胞大小悬殊，有些革兰氏染色反应阳性菌变成阴性反应等。 该时期死亡的细菌以对数方式增加，但在衰亡期的后期，由于部分细菌产生抗性也会使细菌死亡的速率降低。 现象： 特点： 二、生长的数学模型 由一个细胞分裂成为两个细胞的时间间隔称为世代，一个世代所需的时间就是代时（Ｇeneration time, G ），代时也就是群体细胞数目扩大一倍所需 时间，有时也称为倍增时间。 ★指数生长可以用下式表示： b = B×2n B, b 和 t 可由试验获得， n 可通过上式计算得出，将等式两侧取对数重排后得： lgb = lgB + nlg2 lgb - lgB lgb - lgB ?? lg2 0.301 n= = 例如：一培养液中微生物数目由开始的12，000（ B ），经4h （ t ）后增加到49，000，000（ b ）， 这样， n ＝ (lg4.9×107－lg1.2×104