第五章植物胚胎培养和离体授粉要点.pptVIP

第五章 植物胚胎培养和离体授粉 一、什么是植物胚胎培养 植物胚胎培养（embryo culture）是植物组织培养的一个重要领域。植物胚胎培养是指植物的胚（种胚）及胚器官（子房、胚珠、胚乳）等进行离体无菌培养，使其发育成幼苗的过程。 二、胚的发育 花柱 雌蕊群 柱头 子房 胚珠（大孢子囊） （将来发育为果实） （将来发育为种子） 产生 大孢子（胚囊） 成熟的胚囊（8核7细胞） 卵细胞 胚 的 发 育 胚的发育:受精卵不均等分裂—→顶端细胞→原胚期→球形胚期→心形胚期→鱼雷胚期→子叶期→完整的胚 三、植物胚的培养 最早1904年Hanning成功培养了萝卜和辣根菜的胚，世界首例 。 Laibach在1925～1929年间，通过培养亚麻种间杂种幼胚，成功地获得了种间杂种，首次证实了这种方法在实际应用中的价值 1、成熟胚的培养 成熟胚(mature embryo) ：指子叶期以后发育至具有胚芽、胚柄、胚根和子叶的胚。 成熟胚培养：将子叶期以后的胚从母体上分离出来，在适宜的条件下，使其进一步生长发育形成苗的过程。 成熟胚的培养，大多是来研究胚发育过程的形态建成、生长物质的作用、各部分的相互关系，以及营养要求等生理问题。1982年，王玉英等人对山楂胚培养及苗木的快速繁殖进行了研究，使当年收获的山楂种胚打破休眠，使没有经过低温砂藏的种子萌发出小苗。 2、幼胚培养(immature embryo culture) 幼胚：指发育到子叶期以前的胚 幼胚培养的关键技术： 取材时期幼胚剥离 培养条件的控制（是否需要特殊处理） 幼胚离体培养的生长发育方式 幼胚培养中，常见的生长方式有三种 (1)、胚性发育(embryonal development) (2)、早熟萌发(early mature sprouting) (3)、愈伤组织(callus) 在许多情况下，幼胚在离体培养中首先发生细胞增殖，形成愈伤组织。 幼胚培养在远缘杂交育种上有极大的利用价值。 1943年罗士韦成功地进行了云南油杉和铁杉的幼胚培养研究。 特别在杂种离体幼胚培养工作与生产实际紧密结合上，获得了大白菜×甘蓝、萝卜×大白菜、栽培棉×野生棉、栽培大麦×普通小麦等十多个种属间或种间的杂种植物 目前植物离体幼胚的培养方法已成为杂交育种工作中的一个常规育种手段，广泛应用于育种实践 例：杂种桃成熟胚培养 果实中取出杂种胚 70％酒精20s 5％次氯酸钠15min 无菌水冲洗4～5 次，超净台上剥去种皮接种到MS培养基上 3～5℃ 暗培养60d 25℃光照培养诱导出苗 移栽 幼胚培养方法 1、材料的选择与灭菌 确定授粉后天数与胚胎发育的相应关系，对于远缘杂种胚，要在其夭折前培养。 2、幼胚的分离及培养 分离：先取出胚珠，剥离珠被，取出完整的幼胚，后培养。 培养：胚离体培养发育时期分为异养期和自养期。在心形期转入自养生长。对于难培养的幼胚，可利用胚乳看护培养。 黄瓜远缘杂种幼胎培养 3、胚培养的意义 克服远源杂交育种中杂种胚的早期夭折。 克服种子休眠，缩短育种年限，提高育种效率。 使无生活力的种子萌发 ，提高种子萌发率 杏、桃、苹果、梨、李等多种果树上获成功，并用于生产。 四、胚乳培养（endosperm culture） 胚乳培养的最早研究始于1933年，Lampe和Mills首例进行了玉米胚乳培养。 1、胚乳培养的意义 研究胚乳发育的全能性 研究胚乳与胚之间的关系 育种 产生三倍体，例如无籽西瓜、无籽苹果 2、植物胚乳的发育特性 被子植物胚乳 是双受精的产物，三倍体 植物胚乳 裸子植物胚乳 受精前就有的，是单倍体 禾本科植物：胚乳贮存养料，促进种子萌发 豆类、瓜类种子：胚乳消失，营养转移到子叶中 五、子房、胚珠的培养 1、子房、胚珠培养类型 授粉前（未受精）的子房、胚珠培养。 授粉后（ 受精）的子房、胚珠培养。 受精胚珠培养（胚珠内胚的发育处于早期阶段，从两个细胞的原胚开始到球形胚阶段，实际是幼胚的培养） 2、未授粉子房、胚珠培养的意义: 试管受精提供技术基础(离体授粉）； 获得获得单倍体植株，用于单倍体育种。 3、授粉后子房、胚珠培养的意义: （类似于幼胚培养） 防止杂种胚早期败育，获得杂种植株； 六、植物离体授粉 植物离体授粉（in vitro pollination）又称离体受精（in vitro fertilization） 或试