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转录 (transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程 。 也就是把DNA的碱基序列抄录成RNA的碱基序列。 一、转录模板 结构基因：strucural gene 能转录出mRNA然后指导蛋白质生成 的部分。 模板链：template strand 可作为模板转录成RNA的一股链。也称作负链、反义链或Watson链。 编码链：coding strand 相对于模板链的另一股链。也称为正链、有义链或Crick链。 模板: 转录、翻译的序列比较 转录的不对称性 不对称转录：asymmetric transcription DNA双链对一个基因而言，一股可转录，另一股不转录。 模板链与编码链相对而言 二、 RNA聚合酶 转录酶：依赖DNA的RNA聚合酶 DNA dependent RNA polymerase DDRP 原核生物的RNA聚合酶 大肠杆菌的RNA聚合酶：?2??’?（4种亚基组成的五聚体聚合物） 其中?2??’称为核心酶：只有转录功能 ?亚基：辨别转录起始点 ? +?2??’=全酶 受利福平或利福霉素（结核菌药物）的特异性抑制。 原核生物的RNA聚合酶 真核生物的RNA聚合酶 三、模板与酶的辨认结合 转录起始过程 转录的延长 转录的延长是以5’到3’的方向进行的。 (NMP)n+NTP?(NMP)n+1+PPi 以G=C、A=U、T=A碱基配对。 转录完成部分的DNA重新形成双链。 较长的RNA链上有核糖体结合，说明在某些情况下，转录的同时，翻译已经开始进行了。 转录的延长 （三）转录的终止 转录终止：是RNA聚合酶在模板上的某一位置停顿，RNA链从转录复合物上脱离出来。 转录终止分为： 依赖Rho（ρ）因子的转录终止 不依赖Rho（ρ）因子的转录终止 不依赖Rho因子的转录终止模式 原核生物、真核生物转录起始位点的结构差异 真核生物转录终止的特点 真核生物mRNA带有聚腺苷酸尾巴的结构，这是转录之后加上的。 在模板链读码框架的3’端之后，常有一组共同序列AATAAA，再下游还有相当多的GT序列，这些序列称为转录终止的修饰点。 转录后的修饰 转录生成的RNA，称为初级转录产物。 无论在真核生物或原核生物中，初级转录产物都经过一定程度的修饰加工，才能表现其功能。 3’端加上聚腺苷酸尾巴 真核生物mRNA中poly A的出现是不依赖于DNA模板的。 加入poly A之前，先由核酸外切酶切去3’末端一些过剩的核苷酸，然后加入polyA。 3’端修饰也是在细胞核中，在剪接之前进行的。 Poly A的有无与长短，是维持mRNA作为翻译模板的活性，以及增加mRNA本身的稳定性。 3’端修饰示意图 真核细胞mRNA的剪接 DNA模板与hnRNA是完全配对的，而成熟的mRNA与hnRNA或DNA杂交都只是部分配对。 因此真核生物的基因有断裂性。 内含子的功能 内含子有利于物种的进化选择 调节功能 二、tRNA的转录后加工 初级产物中有5’端的16个碱基和反密码子环的14个碱基需要去除。 涉及加工的反应 甲基化 还原 核苷内的转位反应 脱氨反应 3’端加上CCA-OH rRNA的转录后加工 丰富基因：染色体上一些相似或完全一样的纵列串联基因单位的重复。 真核细胞的rRNA基因属于丰富基因。 45s的转录产物是三种rRNA的前体，经过剪接后形成核糖体小亚基的18S rRNA，其余形成5.8S及28S的rRNA。 本章重点 概念：转录；转录起点（启动子）；转 录终点（终止子） 复制与转录的异同点； 真核生物RNA聚合酶有几种，及其对应的主要转录产物； 原核生物启动子的构成元件； 真核生物Ⅱ类启动子（RNA聚合酶Ⅱ启动子）的构成元件； 真核生物mRNA的转录后加工包括哪几方面； 一、真核生物mRNA的转录后加工 鸡卵清蛋白基因 hnRNA 首、尾修饰 hnRNA剪接 成熟的mRNA 鸡卵清蛋白基因及其转录、转录后修饰 鸡卵清蛋白成熟mRNA与DNA杂交电镜图 DNA mRNA 二、tRNA的转录后加工 tRNA前体 RNA pol Ⅲ TGGCNNAGTGC GGTTCGANNCC DNA RNAaseP、内切酶 tRNA核苷酸转移酶、连接酶 ATP ADP 碱基修饰 （2）还原反应 如：U ? DHU （3）核苷内的转位反应 如：U ? ψ （4）脱氨反应 如：A ? I 如：A ? Am （1）甲基化 （1） （1） （3） （2） （4） 三、rRNA的转录后加工 转录 45S - rRNA 剪接 18S - rRNA 5.8S和