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第 15 章 蛋白质的生物合成 遗传信息流动示意图 15.1 蛋白质合成体系 mRNA 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 遗 传 密 码 三联体密码的破译 缺失或插入核苷酸引起三联体密码的改变 以均聚物为模板指导多肽的合成 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 核糖体结合技术 遗传密码字典 遗传密码的性质 反密码子与密码子之间的碱基配对 1966年Crick根据立体化学原理提出: 人线粒体中变异的密码子 中心法则指出,遗传信息的表达最终是合成出具有特定氨基酸顺序的蛋白质,这种以mRNA上所携带的遗传信息,到多肽链上所携带的遗传信息的传递,就好象以一种语言翻译成另一种语言时的情形相似,所以称以mRNA为模板的蛋白质合成过程为翻译(translation)。 翻译过程十分复杂,需要mRNA、tRNA、rRNA和多种蛋白因子参与。在此过程中mRNA为合成的模板,tRNA为运输氨基酸工具,rRNA和蛋白质构成核糖体,是合成蛋白质的场所,蛋白质合成的方向为N—C端。 核糖体 DNA mRNA tRNA t RNA 核糖体 mRNA和遗传密码 辅助因子 (messenger RNA)是蛋白质生物合成过程中直接指令氨基酸掺入的模板,是遗传信息的载体。 m R N A 原核生物和真核生物mRNA的比较 15.1.1 5′ 3′ 顺反子 顺反子 顺反子 插入顺序 插入顺序 先导区 末端顺序 AGGAGGU SD区 特点 半衰期短 许多原核生物mRNA以多顺反子形式存在 AUG作为起始密码;AUG上游7~12个核苷酸处有一被称为SD序列的保守区, 16S rRNA3’- 端反向互补而使mRNA与核糖体结合。 5′ “帽子” PolyA 3′ 顺反子 m7G-5′ppp-N-3 ′ p 帽子结构功能 使mRNA免遭核酸酶的破坏 使mRNA能与核糖体小亚基结合并开始合成蛋白质 被蛋白质合成的起始因子所识别,从而促进蛋白质的合成。 Poly(A)尾巴的功能 是mRNA由细胞核进入细胞质所必需的形式 它大大提高了mRNA在细胞质中的稳定性 AAAAAAA-OH 三联体密码的破译 遗传密码的性质 遗传密码: DNA(或mRNA)中的核苷酸序列与蛋白质中氨基酸序列之间的对应关系称为遗传密码。 密码子(codon):mRNA上每3个相邻的核苷酸编码蛋白质多肽链中的一个氨基酸,这三个核苷酸就称为一个密码子或三联体密码。 遗传密码字典 15.1.1.1 ?1954年Gamov确认核酸分子中三个碱基决定一个氨基酸 ? 1961年Crick 等用遗传学方法也证实三联体密码子学说是正确的 ? Nirenberg以均聚物共聚物为模板指导多肽的合成,寻找到了破译遗传密码的途径 ? Khorana以共聚物指导多肽的合成,加快了破译遗传密码的步伐 CAT CAT CAT CAT CAT CAT CAT CA?C ATC ATC ATC ATC CAT CA?C AXT CAT CAT CAT CAX TXC ATX CAT CAT CAT -1 -1,+1 +3 Poly U 为模板,产生的多肽链为Poly Phe Poly A 为模板,产生的多肽链为Poly Lys Poly C 为模板,产生的多肽链为Poly Pro (1)以多聚二核苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽 ,如以Poly UG 为模板,合成产物为Poly Lys-Val。 (2)以多聚三核苷酸作为模板,可得三种氨 基酸组成的多肽。 技术要点: 保温 硝酸纤维滤膜过滤 分析留在滤膜上的核糖体-AAtRNA 确定与核糖体结合的AA 以人工合成的三核苷酸为模板+核糖体+AA-tRNA U A C G UCAG U C A G 第二位 第一位(5ˊ) 第三位(3ˊ) UCAG UCAG UCAG 1、密码是无标点符号的且相邻密码子互不重叠。 2、密码的简并性:由一种以上密码子编码同一个 氨基酸的现象称为简并性( dogeneracy),对应于同一氨基酸的密码子称为同义密码子(Synonymous codon)。密码的简并性可以减少有害突变 。 3、密码的摆动性(变偶性):密码的专一性主要是由第一第二个碱基所决定,tRNA上的反密码子与mRNA密码子配对时,密码子的第一、二位碱基是严格的,第三位碱基可以有一定的变动。Cric
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