第五章第二节基因技术分析.ppt

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(2)肽链延长的第二步:成肽 在转肽酶的催化下,P位上的tRNA所携的甲酰蛋氨酰基转移给A位上的新进入的氨酰-tRNA,形成肽链。原在P位上的、脱去甲酰蛋氨酰基的tRNA从复合物中迅速脱落,使P位留空。 (3)肽链延长的第三步:转位 在转位酶/延长因子G(EFG)的催化下,在A位的二肽连同mRNA从A位进入P位。实际是整个核糖体的相对位置移动。第三位氨基酸按密码的指引进入A位注册,开始下一轮循环。(蛋氨酸氨基肽酶;1个GTP三磷酸鸟苷 ) 4、肽链的终止和释放 终止密码子进入A 位点,无相应tRNA与之结合,RF在GTP下识别终止密码子结合于A位 肽基转移酶被激活,催化P位上的肽酰-tRNA酯键水解,使肽基与水分子结合 多肽链合成终止,新生肽链和tRNA从P位上释放,核糖体大小亚基分离,进入新一轮循环 。 3. 肽链合成的终止 蛋白质合成后的加工与修饰 (1).氨基端和羧基端的修饰 1. 氨基端和羧基端的修饰 2. 共价修饰 (1)磷酸化 (2)糖基化质膜蛋白质和许多分泌性蛋白质都具有糖链,这些寡糖链结合在丝氨酸或苏氨酸的羟基上 (3)羟基化 (4)二硫键的形成: 3. 亚基的聚合 4. 水解断链: 三、原核生物基因 原核生物具有以下特征: 1 功能相关的基因一般高度集中,组成操纵子(是指数个功能上相关的结构基因串联在一起,构成信息区,连同其上游的调控区以及下游的转录终止信号所构成的基因表达单位)的形式。同一个操纵子中的基因共同转录成一个多顺反子。 2 编码蛋白质的基因是单拷贝基因。 3 RNA基因多是多拷贝基因。 4 绝大多数的基因是连续的,结构基因之间少有居间序列。细菌中的75%DNA是用来编码基因的,另外的25%是基因间DNA,与染色体的复制、染色体DNA的包装等有关。 5 基因DNA序列中几乎没有或很少内含子 6 基因组中重复序列少。 7 单个染色体成环状。 8 几乎所有的细菌都有染色体外的基因,存在于质粒中,是对染色体基因的补充 四、真核生物基因特点 1 真核细胞基因转录产物为单顺反子(即一个基因编码一条多肽链或RNA链,每个基因转录有各自的调节元件。)。而原核细胞多为多顺反子(即若干个基因由一个启动子控制,转录在一条mRNA上)。 2 存在重复序列,重复次数可达百万次以上 3 基因组中不编码的区域多于编码区域。 4 多数基因含有内含子,是断裂基因,DNA中的内含子在转录后要被除去。 5 基因组中有基因家族存在。 基因的不连续性 基因家族:真核细胞的基因组中有许多来源相同、结构相似、功能相关的基因 重复基因结构:中度重复和高度重复序列 五、细胞器基因 染色体外的基因主要存在于线粒体、叶绿体以及细菌的质粒等中, (1)线粒体 线粒体中DNA含有的基因的遗传方式是母性遗传,或叫做非孟得尔遗传 (2)叶绿体 叶绿体的基因的特征在许多方面与线粒体中的基因有类似的特点: (1)大多数植物的叶绿体中含有的基因数目大致相同,为200个左右,包括rRNA基因、tRNA基因以及核糖体蛋白质基因和与光合作用有关的一些蛋白质的基因。 (2)高等植物中的叶绿体DNA一般为140 kb左右,低等植物为200 kb。 (3)各种生物的叶绿体基因非常保守,基因编码光合作用有关的蛋白,有的基因有内含子。 (4)基因组是双链环状,没有组蛋白,不形成超螺旋。 (5)叶绿体中含有的基因均是多拷贝的,具体数目在物种之间存在差异。 (6) 叶绿体基因工程 第二节 基因 谭 桂 甲 调节转录活动。 增强子 尾部区 基因 转录单位 非编码区 调控 区 外显子:具有编码意义 内含子:无编码意义 前导区 启动子 终止子 mRNA裂解信号 回文结构 一、基因的分子生物学定义? 基因是指DNA分子中具有功能活性的片段,基因不仅包含编 码?RNA的核酸序列,还包括为保证转录所必需的调控序列。 由四个部分组成即: 编码区 前导区 尾部区 内含子 外显子 内含子:位于编码序列之间,通常指基因中能被转录成前体转录物但却不能成为mRNA组成成分的序列。 外显子:即编码序列,也就是DNA分子中编码mRNA某一部分序列的区域,转录时外显子与内含子均被转录在hnRNA中,然后经转录后的剪接加工过程,去除内含子结构部分,外显子转录再连接成一个完整的成熟的RNA分子。 启动子 终止子 编码区上游 编码区上游 前导区:位于编码区的前面相当于mRNA起始密码5′端的非编译序列; 尾部区:位于编码区之后,指mRNA分子3′端终止密码子后面的非翻译序列。 基因的生物学定义:一个基因决定一个性状。 二、基因的功能: 基因转录是在细胞核内进行的。它是指以DNA的一条链为模

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