化学药物刺激性、过敏性和溶血性试验研究的内容及其目的和意义精要.docVIP

引言 化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究必须执行《药物非临床研究 质量管理规范》。试验设计应遵循随机、对照、重复的原则。化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究试验设计应结合毒性的发生机制、影响因素、临床意义和药物临床应用的适应症和给药方法等来考虑。 动物种属的选择应依据拟采用的试验模型和观察的指标。动物的性别、年龄和生理状态应符合拟采用试验方法的要求。试验用药物应与用于人体的制剂一致。给药方式（包括剂量、途径和方案）应根据所采用的试验模型和拟定临床应用的情况来决定。观察部位应选择给药部位，同时考虑选择周围组织或可能暴露于受试药物的部位。如果其他非临床安全性研究（如长期毒性）的受试物与拟进行临床研究的制剂相同或具有可比性，其研究结果可反映化学药物刺激性、过敏性和溶血性中的某一毒性，则可不进行相应的毒性研究。 进行化学药物刺激性、过敏性和溶血性研究时应尽可能明确受试物的成分（包括主药、辅料和杂质等的名称和量）。有相同给药途径上市制剂刺激性和/或过敏性和/或溶血性研究提示有一定毒性时，应与已上市制剂进行比较性研究，毒性应相当或更小。比较性研究的样本例数的确定应遵循统计学的基本原理。由于动物试验存在一定的局限性，因此进行化学药物刺激性、过敏性和溶血性评价时，应结合药学、药理、毒理及临床应用进行综合评价，明确药物是否能进行临床应用及临床应用时应关注的问题等。 1化学药物刺激性 刺激性是指非口服药物制剂给药后对给药部位产生的可逆性炎症改变，若给药部位产生了不可逆性的组织损伤则称为腐蚀性。 1.1化学药物(外用)刺激性试验的内容 1.1.1试验动物 首选家兔，动物数 4-8 只，雌、雄各半。应设赋形剂对照，采用同体左右侧自身对比法。试验前24 h对给药区（通常在背部）进行脱毛处理（可剪、剃或用适宜的脱毛剂）。去毛范围左、右各 3cm×3cm。给药前应检查去毛皮肤是否因去毛而受损伤，有损伤的皮肤不宜进行试验。但若需考察破损皮肤的刺激性，则可在用药部位用砂纸磨或划“井”字并以渗血为度。 1.1.2受试物的给予 取受试物0.5 ml直接涂布于一侧已去毛的皮肤上，然后用二层纱布（2.5 cm×2.5cm）和一层玻璃纸或类似物覆盖，再用无刺激性胶布和绷带加以固定；另一侧涂布赋型剂做对照。贴敷时间至少4h。贴敷结束后，除去受试物并用温水或无刺激性溶剂清洁给药部位。多次给药皮肤刺激性试验应连续在同一部位给药，每次给药时间相同，贴敷期限一般不超过4w。 1.1.3动物观察 在自然光线或全光谱灯光下观察皮肤反应。参照表1给出的评分标准对皮肤红斑和水肿进行评分。 表1皮肤刺激反应评分标准 刺激反应 分值 红斑 无红斑 0 轻度红斑（勉强可见） 1 中度红斑（明显可见） 2 重度红斑 3 紫红色红斑到轻度焦痂形成 4 水肿 无水肿 0 轻度水肿（勉强可见） 1 中度水肿（明显隆起） 2 重度水肿（皮肤隆起 1mm，轮廓清楚） 3 严重水肿（皮肤隆起 1mm 以上并有扩大） 4 最高总分值 8 表2皮肤刺激强度评价标准 分值 评价 0-0.49 无刺激性 0.5-2.99 轻度刺激性 3.0-5.99 中度刺激性 6.0-8.0 强刺激性 单次给药皮肤刺激性试验，在去除药物后 30-60min，24、48 和72 h肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况。如存在持久性损伤，有必要延长观察期限以评价上述变化的恢复情况和时间。但延长期一般不超过 14d。对出现中度及以上皮肤刺激性的动物应在观察期结束时对给药局部进行病理组织学检查。 多次给药皮肤刺激性试验，在每次去除药物后 1h以及再次贴敷前观察及记录红斑及水肿、涂敷部位是否有色素沉着、出血点、皮肤粗糙或皮肤菲薄情况及其发生时间及消退时间，并对红斑及水肿进行评分。末次贴敷后，在去除药物后 30-60 min，24、48和72 h肉眼观察并记录涂敷部位有无红斑和水肿等情况。如存在持久性损伤，有必要延长观察期限以评价上述变化的恢复情况和时间。但延长期一般不超过14d。对出现中度及以上皮肤刺激性的动物应在观察期结束时对给药局部进行病理组织学检查。 1.1.4结果评价 单次给药皮肤刺激性试验，计算每一观察时间点各组受试物及赋形剂皮肤反应积分的平均分值。将受试物皮肤反应积分的平均分值减去赋形剂皮肤反应积分的平均分值得到原发性刺激指数，按表2进行刺激强度评价。多次给药皮肤刺激性试验，首先计算每一观察时间点各组原发性刺激积分均值，然后计算观察期限内每天每只动物刺激积分均值即累积刺激指数，按表2进行刺激强度评价。 1.1.5试验意义 观察动物皮肤接触受试物后所产生的刺激反应，提示药物临床应用后皮肤可能出现的炎症、组织变性和坏死等不良反应。该试验系统比人皮肤刺激反应敏感，刺激反应阴性大多可确