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7-平板菌落计数法
CHERY AUTOMOBILE 1 微生物学实验 学习平板菌落计数法。 三.实验步骤 1.编号 取无菌平皿9个,分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6(稀释度)各三套。另取6支试管,加入9ml无菌水,依次标明10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。 2.稀释 水样:用1ml无菌试管吸取1ml样品精确加入加有9ml无菌水的10-1的试管中,此即为10倍稀释。将10-1试管振荡,使其充分混匀。用另一吸管吸取10-1菌液1ml,精确加入0.5ml至10-2试管中,此即为100倍稀释。其余10-3、10-4、10-5、10-6依次类推。 固体样品:准确称取10g上午膜样,加入90ml无菌水中,充分混匀后即为10倍稀释。将10-1试管振荡,使其充分混匀。用另一吸管吸取10-1稀释液1ml,精确加入0.5ml至10-2试管中,此即为100倍稀释。其余10-3、10-4、10-5、10-6依次类推。 三.实验步骤 3.加样倒平板: 用不同的灭菌吸管分别吸取10-4、10-5、10-6稀释液1ml,分别注入3个灭菌培养皿中。分别立即倾注约15ml已熔化并冷却到45?左右的牛肉膏蛋白胨培养基,并立即在桌面上作平面旋摇,使水样与培养基充分混匀(每稀释度做3个)。另取一空的灭菌培养皿,倾注牛肉膏蛋白胨培养基15ml,做空白对照。培养基凝固后,倒置于37℃温箱中培养。 三.实验步骤 4.计数 培养24-48h后,取出培养平板,并按下列公式进行计算: 每毫升中菌落形成单位(cfu)=同一稀释度的平均菌落数x稀释倍数 注: 一般选择每个平板上长有30-300个菌落的稀释度计算每毫升的含菌量较适宜。 三.作业: 计算菌体含量(单位:cfu/mL)。 沈阳广众 * 实验八 微生物检测 刘森林 执 教 单 位 生命科学学院 实验目的 实验原理 沈阳广众
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