生化20重组DNA技术课件.pptVIP

* * * * * * * * * * 1. 质粒 (plasmid)载体 细菌培养 质粒扩增并表达蛋白质 大肠杆菌 染色质 质粒 细菌染色质以外的双链环状DNA， 能自我复制和表达其携带的遗传信息。 Ampr ORI Tetr pBR322质粒：一种克隆质粒 ORI：复制起始点， 保证高拷贝自我复制。 结构与功能： Ampr, Tetr： 两个抗性基因用于 筛选阳性克隆。 Pst I, BamH I： 两个单酶切位点用于插入目的基因 分子量较小 拷贝数较高 pUC18/pUC19 pUC19 2686 bp Ampr Lac Z P(BLA) Plac Ori Ava I (413) Bam HI (418) Eco RI (397) Hin dIII (448) Pst I (440) Sma I (415) Xma I (413) Apa LI (178) Apa LI (1121) Apa LI (2367) MCS MCS：Multiple Clonning Site 提供多个单酶切位点用于克隆操作 LacZ: 蓝白斑筛选阳性克隆 第四节 目的基因的获得和体外重组 一、目的基因的获得 ----分 二、目的基因的体外重组 ----切、接 目的基因 (target DNA) cDNA (complementary DNA) 基