全反式维甲酸对多种恶性肿瘤细胞血管生成影响.pdfVIP

摘要 全反式维甲酸对多种肿瘤细胞血管生成的影响 研究生王珍珍 导师路太英 郑州大学第一附属医院肿瘤科 河南郑州450052 摘要 背景及目的 2012年经流行病学统计，我国恶性肿瘤发病前十位主要是肺癌、消化系统 癌(胃癌、结直肠癌、肝癌、食管癌、胰腺癌)、乳腺癌、淋巴瘤、膀胱癌、甲 状腺癌。这十类肿瘤占全部恶性肿瘤发病的76．39％。根据第2l届世界抗癌大会 公布的数据，中国癌症发生率目前处于快速上升期。在河南，目前食管癌发病 率仍较其它地区高，并且，男性罹患肺恶性肿瘤及女性罹患乳腺癌的发生率持 高不下，抗癌治疗在河南的卫生系统总费用支出中占很大比例。 恶性肿瘤的内科治疗在基础研究成果的基础上，正在不断推进，较大幅度 的提高了癌症生存率。自1971年，由哈佛大学judah folkman博士提出肿瘤生长 的血管依赖性理论后，全球肿瘤内科专家、药物专家等在肿瘤治疗中创出一种 全新的有别于肿瘤杀死概念的治疗策略，即抗血管生成+抗细胞增殖的A+策略。 肿瘤细胞引起的新生血管过程受局部组织中分泌的调节因子调控。起促进 作用的调节因子如下：血管内皮细胞生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic Fibroblast Growth Factors，bFGF)、 血小板衍生生长因子(Platelet．Derived Growth factor,PDGF)、血管生成素 (Angiopoietin，Ang)、肿瘤坏死因子．0(Tumor Necrosis Factor-O，TNF．Q)、 转化生长因子．B(Transforming Growth Factor-B，TGF．B)、表皮生长因子 (Epidemal Growth Factor,EGF)、纤溶酶原激活因子(Plasminogen Activator,PA) 摘要 等，另外还有一些小分子的脂类、核苷酸及维生素。而干扰素．Q(Interferon． Q，IFN．Q)、内皮细胞抑制素(endostatin)、血管抑制素(angiostatin)、血小板 因子4、碱性成纤维细胞生长因子可溶性受体等发挥抑制作用。 在肿瘤细胞促进新生血管过程中，VEGF起到非常重要及关键的作用。基础 实验创造体外的血管生成模型，其中显示VEGF及其受体可导致内皮细胞增殖 和新的血管生成，故其目前作为主要血管生成抑制剂的靶点。临床治疗肿瘤方 面痴线以VEGF及其受体为靶点的一种治疗方法，贝伐单抗(bevacizumab)，又 名：重组人源性抗VEGF单克隆抗体贝伐单抗，是对这一策略由理论变为现实 的有力证据，贝伐单抗可与血管内皮生长因子(VEGF)结合，阻断其与受体在 内皮细胞表面结合，进而阻断器介导的血管生成过程。之后由我国自主研发的 重组人血管内皮抑制素(恩度)就是血管生成抑制类生物制品，其目标靶点亦 为血管内皮生长生成因子。 维甲酸为维生素A的衍生物，在调控细胞生长，分化、凋亡等过程中起重 要作用，维甲酸类化合物初始为治疗银屑病的有效药物，因其可明显控制角质形 成细胞的增殖及炎症细胞浸润，后由我国学者王振义首次使用全反式维甲酸 (ATRA)治疗急性非淋巴细胞白血病中的M3型，获得了肯定的疗效。许多研 究证明，维甲酸类化合物作用广泛，可诱导肿瘤细胞分化，抑制细胞增殖，促 进肿瘤细胞凋亡的作用，其中以全反式维甲酸抗肿瘤作用研究更确切。目前作 为著名的肿瘤细胞诱导分化剂的代表。但有基础研究表明全反式维甲酸具有一 定血管抑制作用。 本实验使用ATRA体外作用于食管癌细胞ECl09、肺腺癌细胞A549及乳腺 癌细胞MDA．MB．231，观察其对其作用及对VEGF因子的表达的作用。 材料和方法 1体外分别培养食管癌细胞ECl09、肺腺癌细胞A549及乳腺癌细胞 MDA．MB．231，取呈对数期生长细胞，分别给予含10一、104、10一、10一、10。7mol／1 浓度ATRA的培养液连续培养24、48、72、96h。 2应用MTT法检测不同浓度不同时间的ATRA分别作用于三种肿瘤细胞株 的细胞抑制率。 3使用ELISA测定72h后不同浓度ATRA对三种肿瘤细胞株血管内皮生长 II 摘要 因子(VEGF)蛋白表达、分泌的影响。使用单因素方差检测进行统计学分析。 圣士里：口木 1 MTT法 将含5种不同浓度的ATRA培养液培养3种肿瘤细胞，分别在24h、48h、 72h、96h测定其A490，24h时药物对各细胞抑制作用均不明显，无统计学意义 (胗0．05)，其他的时间点ATRA有不同程度的细胞增殖抑制作用，在96h时效 应达最高，并呈剂量相关性，其中10。3 mol／1浓度的抑制率最高。食管癌细胞 ECl09、肺腺癌细胞A549及乳腺癌细胞